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微生物學實驗報告（通用12篇）
在人們素養不斷提高的今天，報告不再是罕見的東西，我們在寫報告的時候要注意邏輯的合理性。那么什么樣的報告才是有效的呢？以下是小編精心整理的微生物學實驗報告，僅供參考，歡迎大家閱讀。
微生物學實驗報告 1
一、實驗名稱
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動
二、實驗目的
1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2、觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布
三、實驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀，在不同的光照條件下，葉綠體可以運動，改變橢球體的方向，這樣既能接受較多的光照，又不至于被強光灼傷。在強光下，葉綠體以其橢球體的側面朝向光源；在弱光下，葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此，在不同光照條件下采集的`葫蘆蘚，其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣�；罴毎械募毎|處于不斷的流動狀態，觀察細胞質的流動，可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志。
四、材料用具
蘚類的葉，新鮮的黑藻，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，刀片，培養皿，鉛筆
五、實驗過程（見書p30）
1、制作蘚類葉片的臨時裝片
2、用顯微鏡觀察葉綠體
3、制作黑藻葉片臨時裝片
4、用顯微鏡觀察細胞質流動
六、討論
1、細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動，為什么？
2、葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系？
3、植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態，這對于活細胞完成生命活動有什么意義？
4、用鉛筆畫一個葉片細胞，標出葉綠體的大致流動方向。
微生物學實驗報告 2
實驗目的
�、睂W習并掌握動物細胞培養的無菌操作技術。
�、擦私庠毎囵B的基本方法及操作過程。
⒊學習細胞計數及營養液的配制。
實驗原理
�、奔毎囵B
原代細胞培養是指直接從動物體內獲取的細胞、組織和器官，經體外培養后，直到第一次傳代為止。這種培養，首先用無菌操作的方法，從動物體內取出所需的組織（或器官），經消化，分解成單個游離細胞，在人工培養下，使其不斷的生長及繁殖。
細胞培養是一種操作繁瑣而又要求十分嚴謹的實驗技術。要使細胞能在體外長期生長，必須滿足兩個基本要求：一是供給細胞存活所必須的條件，如適量的水、無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關的生長因子、氧氣、適宜的溫度，注意外環境酸堿度與滲透壓的調節。二是嚴格控制無菌條件。
⒉細胞死活鑒定死活細胞的鑒定方法有很多種，常用的有染色法和儀器分析法。染色法是常用的細胞死活鑒定方法，簡便，易于操作。不同的死活細胞鑒定方法有各自不同具體的反應機理，但無論采用何種辦法，都是利用了死活細胞在生理機能和性質上的`差異。
染色法分化學染色法和熒光染色法，根據染色機理的不同，染料或使死細胞著色，或使活細胞著色。
死活細胞在生理機能和性質上的差異主要包括：
☆死活細胞細胞膜通透性的差異：活細胞的細胞膜是一種選擇性膜，對細胞起保護和屏障作用，只允許物質選擇性的通過；而細胞死亡之后，細胞膜受損，通透性增加。常用的以臺盼藍鑒別細胞死活的方法就是利用了這一性質。臺盼藍，又稱錐藍，是一種陰離子型染料，不能透過完整的細胞膜。所以經臺盼藍染色后只能使死細胞著色，而活細胞不被著色。甲基藍有類似的染色機理。植物細胞的質壁分離也可鑒定死活。
☆死活細胞在代謝上的差異：是采用美藍染料鑒定酵母細胞死活的依據。美藍是一種無毒染料，氧化型為藍色，還原型為無色。由于活細胞中新陳代謝的作用，使細胞內具有較強的還原能力，能使美藍從藍色的氧化性變為無色的還原型，因此美藍染色后活的酵母細胞無色；而死細胞或代謝緩慢的老細胞，則因它們的無還原能力或還原能力極弱，使美藍處于氧化態，從而被染成藍色或淡藍色。
除此之外，還有一些細胞器的專有染料。如液泡系的專有染料中性紅。中性紅是一種低毒性染料，可以使活細胞液泡著紅色，而細胞質和細胞核不被著色；死細胞的液泡不被著色或淺染，染料彌散于整個細胞中，細胞核和細胞質被染成紅色。有時侯為了增加染色效果可以將兩種染料結合使用，如甲基藍-中性紅混合染色法。
實驗用品
�、辈牧闲“资�
�、苍噭�
臺盼藍、伊紅、PBS緩沖液、細胞培養液（含生長因子）
�、称鞑�
剪子、棉球、75%酒精、移液槍、無菌操作臺、正置光學顯微鏡、倒置光學顯微鏡、解剖盤、滴管、離心管、離心機、注射器、Eppendorf管、培養皿、酒精燈、塑料培養皿、載玻片、蓋玻片、血細胞計數板
實驗步驟
�、比〔�
取小鼠一只，采用斷頭法處死。清水洗小鼠浸入75%酒精中消毒3min，取出轉入超凈工作臺內的解剖盤中，無菌操作打開腹腔，取出其脾臟，除去其周圍的`脂肪組織，并用PBS液自上而下淋洗1-2次，轉入無菌培養皿中待用。
�、卜蛛x脾細胞
用滴管向培養皿中注入30滴PBS緩沖液，再用“L”型針頭注射器在皿中吸取0.2毫升PBS液注入脾臟，注射時沿長軸注射。然后再用針頭在脾臟上扎眼，并用“L”型針頭輕輕刮出脾細胞。在均勻吹勻脾臟細胞。
吸取上述分離的單個脾細胞懸液，放入Eppendorf管中，使量至1mL，以1000r/min離心5min。⒊培養脾細胞
取塑料培養皿一套，用移液槍吸取培養液2mL加入塑料皿中，并將皿標記待用。取離心后的Eppendorf管，棄去上清液，用移液槍（200ul）吸取塑料皿中的培養液400ul加入棄去上清的Eppendorf管中，用槍頭吹勻管底的脾細胞，吸取200ul脾細胞懸液接種于上述塑料皿中，混勻后放入37°C，5%CO2的培養箱中培養。
�、磁渲迫疽�
用生理鹽水配成5%臺盼藍染液，備用。⒌染色
取0.5mL細胞懸濁液放入試管中，加入1-2滴染液�；旌稀�2-5min后將細胞放在血細胞計數板上觀察死活情況，注意不要有
氣泡產生，放大倍數為10x10。染色后活細胞不著色，死細胞顯示藍色。注意染色時間不能超過15min，否則染液將細胞毒殺。
�、队嫈�
在10x10倍的顯微鏡下觀察，計算血細胞計數板的4個4小方格的細胞數量。包括細胞總數與死細胞數量。壓線者計上不計下，計左不計右。
�、酚嬎慵毎盍�
根據公式：細胞活力=(總細胞數-死細胞數)/總細胞數×100%
實驗結果
臺盼藍染色后的細胞（10x10）伊紅染色后的細胞（10x10）
總細胞數和活細胞數統計表（10×10）
項目自己培養細胞老師培養細胞總細胞數個/ml活細胞數個/ml細胞活力1.4×1067.5×1053.0×1055.5×10521.4%73.3%分析與討論
�、苯Y果分析
本次實驗中我們小組自己培養細胞所測細胞活力為21.4%，并不算高，分析得應有以下原因可能影響實驗結果（包括誤差）：
⑴若在無菌操作的過程中操作不規范，導致染菌，會極大的影響觀察，導致實驗失敗。
�、迫粼陔x心分離呈單細胞的過程中離心機轉速過快或時間過長很可能會導致細胞破裂，導致小鼠脾細胞大量死亡。
⑶染色時間過長，或觀察時間過長都會導致染色試劑將細胞殺死，使細胞活力驟降，這是導致細胞活力比較低的重要原因。
�、葘嶒炛械囊恍┎僮鞑徽_或不規范的情況、計算帶來的誤差等也會直接導致實驗誤差。
⒉注意事項
�、艊栏襁M行動物消毒，需用75%酒精消毒。
�、茋栏襁M行無菌操作，防止細菌、霉菌、支原體污染，避免化學物質污染。
⑶吸取液體前，瓶口和吸管硬行火焰消毒；吸取液體時，避免碰撞。
⑷離心管入臺前，管口、管壁應消毒。
�、蓪嶒炚唠x開超凈臺時，要隨時用肘部關閉工作窗。
�、势鞑氖褂脮r既要注意用火焰消毒，又要防止燙傷、燙死細胞。
微生物學實驗報告 3
一、實驗報告的特點
1．實錄性實驗報告是實驗研究工作的如實記錄。內容包括整個實驗的主要過程，如實驗步驟、方法、實驗結果等。
2．科學性科技實驗報告既可以描述創新的內容，又可以記述重復實驗的工作。另外，實驗報告可以不要求具有明確的結論，只要對科學研究有參考或借鑒價值，無論結果是否達到預期要求，都可以寫成科學實驗報告。
3．目的性以如實記載實驗過程與結果為目的的所有科學實驗工作都可以寫成科技實驗報告
4．規范性一般的實驗報告如分析報告、教學中的實（試）驗報告、病理化驗單等，內容比較單一，而且項目固定，并按一定的格式印成表，由實驗者根據要求逐項填寫；比較復雜的實驗，要按一定的格式寫成實驗報告，其寫作方法具有特定的規范性。
二、實驗報告的種類
教學實驗報告這類實驗報告主要指理工科學生撰寫的實驗報告。重復科學技術史上前人已做過的實驗，目的是為了驗證某一學科定律或結論，訓練學生的動手能力和表達能力。其實驗步驟和方法一般是由教師自己擬定的，只不過是教學中的一個環節。這種實驗報告通常印制成表格，由實驗者逐項填寫。它是重復前人已做過的實驗，不具有學術價值。
三、實驗報告的格式寫法
實驗報告的寫作格式主要包括以下幾個部分：
1．標題即實驗或試驗項目的名稱。有時在項目之前加“關于”兩字。如“關于xxx的實驗報告”。實驗報告標題要力求明確、醒目，集中映實驗的內容。
2．摘要摘要是對報告內容不加注釋和評論的簡短陳述，內容具有立性、自含性，即不閱讀報告的全文，就能獲得必要的信息。也供文摘等二次文獻采用。寫摘要要注意：一般應說明實驗的目的、方法、結果和最終結論等；一般不用圖、表、化學結構式等；字數一般不超過200字；位于正文之前。
3．正文
(1）引言。引言部分應是一系列間題的說明，如：研究的對象、實驗的意義和作用；此前該項工作的發展概況以及存在的問題；本實驗要達到的目標，等等。引言要使用概括性的語言敘述，較重要的地方才略作說明，而且點到為止。
(2）主體。
①實驗原理。實驗原理是進行科學實驗的理論依據，因此，在寫作時要做到細致準確。其內容主要包括：簡要介紹實驗涉及的主要概念、主要定律、公式等。原理部分的文字應做到簡明、清晰，易懂。對于比較復雜和比較新穎的實驗，或者考慮到讀者并非都是專家的情況下，可以對實驗所依據的理論作簡要的`說明。否則，原理部分可以省略
�、趯嶒炘O備和方法步驟。實驗設備是實驗報告中比較重要的部分。有關實驗設備應說明其原理、結構、型號、性能，若有自主設計制造的設備，還要附必要的`圖紙和表格，另外還要敘述實驗的條件和對實驗的具體要求。
實驗方法是實驗能否成功的必要條件之一。在寫作時要敘述得全面完整、準確無誤。在說明實驗裝置時，一般按空間順序來表述，說明操作程序時，般按時間順序來表述。
化學實驗中的試劑，應標明形態、濃度、成分等。③結果與討論。這部分是實驗報告的主體，也是讀者最為關注的實質性內容，應力爭寫好。實驗結果一般都用專業術語表述，引用的數字要真實，報告中的圖表、數字要符合規范要求。如果實驗結果的記錄失真，將使實驗報告喪失科學價值。
討論就是從理論上對實驗所得結果進行分析、解釋，闡明結果的必然性。通常是分條進行討論，要求簡短，這也是實驗報告與實驗型論文的區別所在。報告討論的內容可包括：對實驗結果進行具體分析、說明影響實驗的根本因素、實驗結果的適用范圍及與理論結果的差別等。
(3）結論即對實驗結果進行總結評價，同時逐條列出實驗結果。應當用簡練、肯定的語言表達，必要時可引用關鍵性數據，但不再列圖表，不再提出新的事實、證據或材料。
4．致謝致謝是對實驗中給予助的單位或個人表示感謝。
實驗報告的構成并非千篇一律，由于實驗有定性實驗、定量實驗、結構分析實驗、析因實驗、對照實驗、模擬實驗等類型，因此，寫作時重點應有所不同。以上六項構成項目，只是實驗報告的基本構成內容。
四、實驗報告的寫作要求
I．做好實驗是前提要寫好實驗報告，實驗前一定要熟悉實驗原理、儀器設備、操作方法。在實驗中，要按步驟操作，細心觀察現象，正確測取數據，認真做好記錄。
2．做好實驗后的綜合與分析對實驗過程中的各種現象以及最后的結果都要逐一分析，通過分析，揭示出其本質的東西，這也是寫好實驗報告的關鍵。并在此分析的基礎上進一步綜合加工，才真正＿卜升到理性認識，使理論與實驗統一起來。這一過程就是實驗報告由起草到定稿的過程。
3．堅持客觀嚴肅的寫作態度不經重復實驗不得修改數據；在處理數據時，遇到誤差分析和有效數字位數的問題，應按有關要求執行。
4．運用準確嚴密的表達方式
(1）充分利用圖表。圖表比文字敘述要直觀、簡潔、明了。
(2）說明的準確性、條理性。實驗報告的主要表達方式是說明，要求說明準確，言之有序。即在說明物質的性狀時要定性、定量；在說明實驗設備、步驟和方法時要條理分明。
微生物學實驗報告 4
一、【實驗目的】
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質粒DNA的原理和方法。
2、學習并掌握凝膠電泳進行DNA的分離純化的實驗原理。
3、學習并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實驗原理】
1、質粒DNA的制備方法
質粒（Plasmid）是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩定遺傳的一種環狀雙鏈DNA分子，分布于細菌、放線菌、真菌以及一些動植物細胞中，但在細菌細胞中含量最多。細菌質粒大小介于1～200Kb之間，是應用最多的質粒類群，在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質粒自身的DNA。
質粒DNA的制備包括3個步驟：①培養細菌，使質粒DNA大量擴增；②收集和裂解細菌；③分離和純化質粒DNA。主要方法包括：堿裂解法：0.2molNaOH+1%SDS；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；SDS裂解法：10%SDS，一般用于質粒大量提取。在實際操作中可以根據宿主菌株類型、質粒分子大小、堿基組成和結構等特點以及質粒DNA的用途進行選擇。本實驗選擇堿裂解法提取質粒DNA。
2、質粒DNA的提取——堿變性提取法
在細菌細胞中，染色體DNA和質粒DNA均被釋放出來，但是兩者變性與復性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達12.0的堿性溶液中，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性；共價閉合環狀質粒DNA的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學上是相互纏繞的。當用pH值4.6的KAc（NaAc）高鹽溶液調節堿性溶液至中性時，變性的質粒DNA可恢復原來的共價閉合環狀超螺旋結構而溶解于溶液中；但染色體DNA不能復性，而是與不穩定的大分子RNA、蛋白質—SDS復合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心，與復性的溶于溶液的質粒DNA分離。溶于上清液的質粒DNA，可用無水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質類似，乙醇沉淀
DNA的同時，也伴隨著RNA沉淀，可利用RNaseA將RNA降解。質粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白，可通過酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質粒DNA。
3、凝膠電泳進行DNA分離純化
電泳（electrophoresis）是帶電物質在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現象。各種生物大分子在一定pH條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質，它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場中，其中的電離子會發生移動，移動的速度可因電離子的大小形態及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異，就可以區別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段，是分子生物學的核心技術之一。
凝膠電泳技術操作簡單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，EB）或SYBR Gold染色直接觀察到，甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發下也能直接檢測到。需要的話，這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實驗。
分子生物學中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構型和方位進行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質電泳。它的分辨率非常高，長度上相差1bp或質量上相差0.1%的DNA都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行DNA序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進行電泳，并能容納較大的DNA上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物，由β—D—吡喃半乳糖與3，6—脫水—L—吡喃半乳糖組成，相對分子質量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬bp），小片段DNA（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測定DNA的相對分子質量，分離經限制酶水解的DNA的片段，進一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負電荷，在電場中向正極移動。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個因素：樣品DNA分子的大小、DNA分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。
三、【實驗材料】
1、實驗儀器
培養皿、接種環、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養箱、50ml離心管、1.5ml塑料離心管（Eppendorf管）、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛生紙和記號筆、手套等。
2、實驗試劑
LB培養基，抗生素Ap（氨芐青霉素），溶液Ⅰ，溶液Ⅱ，溶液Ⅲ，RNaseA母液，TE緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（PCI）混合液，預冷無水乙醇，TAE電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（EB），DNA相對分子質量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ，5mol/L pH 5.2的醋酸鈉。
四、【實驗步驟】
1、準備實驗
配制LB液體培養基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配LB固體培養基；準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1.5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個 ，將上述物品包好連同配好的培養基一同滅菌。
2、菌體培養
在含有Ap的LB平板上挑取一環攜帶有質粒pUC19的E。coli DH5單菌落，接種于20mlLB液體培養基中進行37℃振蕩過夜培養，培養基中加Ap100ul
�。�100ug/ml），質粒pUC19具有Ap抗性基因，使得帶有pUC19的質粒得以生長。 過夜培養后菌體量大，雜質較多，然后用移液槍吸取過夜培養物2ml轉接于50mlLB液體培養基中，培養基中加入Ap250ul，37℃振蕩培養4—6h至對數生長期后期，生長速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質少，適合提取質粒。
3、質粒提取
（1）稱量空的50ml離心管的重量為14.331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒滿，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細胞。
（2）向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱重得14.437g，則菌體質量為106mg。
（3）洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液Ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細胞提前破裂，防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價金屬離子的螯合劑，可抑制DNase的活性，抑制微生物的生長。Tris—Cl溶液提供適當的pH。
�。�4） 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml（與溶液Ⅰ對應），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發生了從bilayer（雙層膜）結構向micelle（微囊）結構的相變化導致細胞溶解。同時，強堿性使染色體DNA、質粒DNA和蛋白質變性；SDS為下一步沉淀做鋪墊。
�。�5）按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1.5ml（與溶液Ⅰ、Ⅱ對應），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH，因為長時間的堿性條件會打斷基因組DNA，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被PDS共沉淀。同時變性的質粒DNA復性。反應形成的高鹽環境進一步加速了沉淀。
（6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側，用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的.3MNaAc混勻，加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中，DNA分子是帶負電荷的，加一定濃度的NaAc或NaCl，易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
�。�7） 以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。
�。�8）以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質粒呈淺黃色，隨著水分的減少質粒變為無色。所以為了完全溶解質粒，要在離心管上標記質粒所在位置。
�。�9）將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉移到一個Eppendorf管中。TE是pH緩沖液，為DNA提供穩定的生理狀態，呈弱堿性，有利于保護堿基對。同時含有EDTA是二價陽離子的螯合劑，抑制DNA酶作用。
4、質粒純化
�。�1）Eppendorf管中加入RNase A（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0.5—1h
（2）將上述的溶液平均分配到2個1.5ml的微量離心管中，每管0.5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）Tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經Tris飽和后的，顯黃色。苯
酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無色，在中間產生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質。
�。�3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑，但是苯酚留在質粒溶液中會影響DNA的酶切，它本身易被氧化，會損傷質粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質粒中的脂類，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現的泡沫，有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質的存在。
�。�4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中，得上清液400ul。
�。�5）向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻，再加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。
（6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到DNA沉淀，為白色。
�。�7）向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。
�。�8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質粒檢測
�。�1）稱取0.4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標好液面位置，加入40ml的1×TAE電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。
（2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進電泳槽內。在槽內加入1×TAE 電泳緩沖液，至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。
（3）電泳1h，觀察溴酚蘭的帶（藍色）的移動。
�。�4） 把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進EB溶液中進行染色，完全浸泡約5min。
（5）凝膠成像儀觀察。
五、【注意事項】
�。�1）滴加溶液II時，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動作要快，因為強堿在溶液中停留時間不能過長，否則會破壞質粒DNA。
�。�2）加入溶液III后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液III中和強堿使質粒復性，不可劇烈震蕩， 防止染色體DNA斷裂，應該上下顛倒離心管，使其混勻。
微生物學實驗報告 5
【探究內容】
探究種子萌發的環境條件
【探究目的】
�。�、了解種子萌發需要的環境條件。
�。�、學會進行探究實驗的一般方法。
【探究器材】
種子100粒、5個能蓋緊的罐頭瓶、小勺一個、餐巾紙10張、標簽紙5張
【探究過程】
提出問題：光的強弱會對種子萌發產生影響嗎？水的多少會對種子的萌發產生影響嗎？溫度的高低會對種子萌發產生影響嗎？空氣的流通會對種子萌發產生影響嗎？
做出假設：光的強弱、水的多少、溫度的高低都會對種子的萌發產生一定的影響。
制定計劃：準備100顆綠豆種子，5個有蓋的'瓶子，10張紙巾，5張便利貼。1號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，放在空氣流通，有陽光的地方；2號瓶的水不但能濕透紙巾，而且能把種子淹沒，放在空氣流通，有陽光的地方；3號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，用蓋子把瓶子蓋上，使瓶子空氣不能流通；4號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，放在冰箱里，盡量使瓶子里的水不結冰；5號瓶不放水，放在空氣流通，有陽光的地方。
實施計劃：每天都進行實驗并觀察5個瓶子有什么變化，再把每天的變化都紀錄下來。
分析結果：1號瓶大部分能發芽；2號瓶的種子皮破了，但不能發芽；3號瓶只有少許發了芽；4號瓶和5號瓶沒有發芽
得出結論：想要種子發芽，一定要有適宜的光度；需要適量的水分，溫度也要控制好，空氣的流通也有一定的影響，但影響沒有光度、水分和溫度大，相對來說，空氣流通的影響較小。
這個實驗很簡單，我們在做實驗要分以上幾步完成，就會很容易的完成實驗。
【交流與評估】
1、根據你的問題和假設，應當將種子分成幾組？XX每組應有多少粒種子？XX每組只有一粒種子可以嗎？
2、對照組應提供的溫度、水分、空氣等條件應該如何？
3、每個實驗組的處理，除了所研究的條件外，其他環境條件是否應與對照組相同？
微生物學實驗報告 6
一、實驗目的：
1、通過對原核和真核各種形態細胞的光學顯微鏡觀察，了解細胞的形態及其顯微結構；
2、學習顯微測量的方法，對細胞的大小有一直觀認識。
二、實驗材料和儀器：
小白鼠肝細胞切片；雞血紅細胞；蠶豆葉片橫切片；
普通光學顯微鏡；目鏡測微尺；鏡臺測微尺；載玻片；蓋玻片。
三、實驗步驟：
(一)細胞形態觀察
l、動物細胞的觀察
�。�1）人肝細胞切片：在顯微鏡下仔細觀察肝細胞的形態構造。
�。�2）雞血細胞涂片的觀察：觀察血細胞的組成；紅細胞、白細胞、血小板的形態特點。
2、植物細胞的觀察
取蠶豆葉片橫切片的觀察：注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。
（二）細胞的.大小和測量
1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上，再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好，使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動鏡臺測微尺和轉動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊，可轉動目鏡上透鏡進行調焦)，使兩尺左邊的一直線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。
4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm：
鏡臺測微尺的格數
目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10
目鏡測微尺的格數
四、實驗結果：
1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24
2、細胞大小的測量：
五、作業與思考：
1、血細胞按含量高低，主要含有：紅細胞，白細胞，血小板。
白細胞最大，紅細胞次之，血小板最小。紅細胞：主要的功能是運送氧。 白細胞：主要扮演了免疫的角色，當病菌侵入人體時，白細胞能穿過毛細血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過程中起著重要作用。細胞形態見下圖。
2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態圖見下。
3、在不同放大倍數下，測定的細胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍數越大，在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大，而更容易測量準確。
微生物學實驗報告 7
一、實驗原理
當外界溶液濃度大于細胞液濃度時，根據擴散作用原理，水分子會由細胞液中滲出到外界溶液中，通過滲透作用失水;由于細胞壁和原生質層的伸縮性不同，細胞壁伸縮性較小，而原生質層伸縮性較大，從而使二者分開;反之，外界溶液濃度小于細胞液濃度，則細胞通過滲透作用吸水，分離后的質和壁又復原。
二、目的要求
1.初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法;
2.理解植物細胞發生質壁分離和復原的原理。
三、重點難點（實驗報告不寫這一點，可適當調整添加在“注意”這一部分）
1.初步掌握植物細胞質壁分離和復原的實驗方法;
2.臨時裝片的`制作;
3.低倍顯微鏡的使用。實驗器材：紫色洋蔥的鱗片葉、刀子、鑷子、滴管、載玻片、蓋玻片、吸水紙（濾紙代替，濾紙可分為剪開幾條）、顯微鏡;
四、方法步驟
臨時裝片制作：
1選材：選用紫色特別深的洋蔥外表皮;說明：在實驗之前，最好將洋蔥放在水中浸泡一下，可以使洋蔥吸水多一些，而且代謝也比較旺盛，實驗效果明顯。
2：將洋蔥的外層剝去兩層（因為處于最外的可能已經死亡）。取表皮：在洋蔥的外表皮上，用刀片劃“井”字，用鑷子輕輕撕取一小塊;（關鍵：最好撕取單層細胞，如果撕的太厚，則會使細胞重疊，嚴重影響實驗效果;）
3制片：在載玻片中央滴上一滴純凈水，然后將取下的洋蔥表皮放在水中，輕輕展開。確保洋蔥表皮平整無卷曲，并且水中不能有氣泡。接著，將蓋玻片以45°角慢慢放置在載玻片上，確保清水充滿載玻片和蓋玻片之間的空間，使其擠出所有空氣。
4蓋玻片一端滴入糖水，于另一端用吸收紙重復幾次吸引（可重復幾次滴糖水和吸引的過程）。
質壁分離實驗后可接著進行質壁復原
質壁復原實驗
處理
取下臨時裝片，在一側滴入清水，另一側再用吸水紙重復幾次吸引，以確保洋蔥表皮細胞完全浸在幾乎是清水中;（注：無吸水紙可先用濾紙代替）
觀察
在低倍鏡下觀察到一個細胞，發現了一個明顯的質壁分離現象。細胞中央的液泡逐漸變大，顏色也變淺，最終細胞質和細胞壁再次緊密結合在一起。如果質壁分離沒有復原，那就說明外部溶液的濃度過高，導致了細胞的死亡。根據以上觀察，得出以下總結：當細胞內液體的濃度小于外部溶液的濃度時，由于滲透作用，細胞會失去水分而發生質壁分離現象；而當細胞內液體的濃度大于外部溶液的濃度時，細胞則通過滲透作用吸收水分，并發生質壁分離的復原現象。
分離實驗特例
如果外界溶液包括葡萄糖、硝酸鉀、氯化鈉、尿素和乙二醇等物質，當細胞進行質壁分離后，由于細胞主動或被動地吸收了溶質微粒，導致細胞液濃度增加。這時，植物細胞會通過吸水使質壁分離部分自動復原。
注：質壁分離與復原結構示意圖
微生物學實驗報告 8
年級班實驗人：組次：試驗時間：
一、探究目的
1、通過探究幫助學生理解樺尺蠖體色變化的整個過程。
2、理解保護色對生物生存的意義。
二、探究步驟
1、發現并提出問題：______________________________________。
2、作出假設：___________________________________________________ 。
3、制定計劃：
4、實施計劃：認真記錄和分析探究的過程和結果和。
5、得出結論：_________________________________________________________ 。
6、表達交流。
三、討論
1、第一代和第二代之間有什么變化？
2、第一代和第五代之間又有什么變化？
3、你能推測保護色的`形成過程嗎？從中你能簡單分析生物進化的原因嗎？
微生物學實驗報告 9
實驗五比較酶和Fe3+的催化效率
考點提示：
(1)為何要選新鮮的肝臟?因為在不新鮮的肝臟中，過氧化氫酶的活性會由于細菌的破壞而降低。
(2)該實驗中所用試管應選較粗的還是較細的?為什么?應選用較粗的，因為在較細的試管中容易形成大量的氣泡，而影響衛生香的復燃。
(3)為何要選動物的肝臟組織來做實驗，其他動植物的組織的研磨液能替代嗎?因為肝臟組織中過氧化氫酶含量較豐富;其它動植物組織也含有少量的過氧化氫酶，所以能夠替代。
(4)相同質量的塊狀肝臟和肝臟研磨液，哪一個催化效果好?為什么?研磨液效果好;因為它增加過氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。
(5)滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時，可否共用下個吸管?為什么?不可共用，防止過氧化氫酶與氯化鐵混合，而影響實驗效果。
實驗六色素的提取和分離
1、原理：葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素
各色素在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上擴散速度不同——分離色素
2、步驟：
(1)提取色素研磨
(2)制備濾紙條
(3)畫濾液細線：均勻，直，細，重復若干次
(4)分離色素：不能讓濾液細線觸及層析液
(5)觀察和記錄：結果濾紙條上從上到下依次為：橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b)。
考點提示：
(1)對葉片的要求?為何要去掉葉柄和粗的時脈?綠色、是深綠色。因為葉柄和葉脈中所含色素很少。
(2)二氧化硅的作用?不加二氧化硅對實驗有何影響?
為了使研磨充分。不加二氧化硅，會使濾液和色素帶的顏色變淺。
(3)丙酮的作用?它可用什么來替代?用水能替代嗎?
溶解色素。它可用酒精等有機溶劑來代替，但不能用水來代替，因為色素不溶于水。
(4)碳酸鈣的作用?不加碳酸鈣對實驗有何影響?
保護色素，防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會變成黃綠色或褐色。
(5)研磨為何要迅速?要充分?過濾時為何用布不用濾紙?研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發;只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙，但能通過尼龍布。
(6)濾紙條為何要剪去兩角?防止兩側層析液擴散過快。
(7)為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線?因為鋼筆水或圓珠筆油中含有其它色素，會影響色素的分離結果。
(8)濾液細線為何要直?為何要重畫幾次?防止色素帶的重疊;增加色素量，使色素帶的顏色更深一些。
(9)濾液細線為何不能觸到層析液?防止色素溶解到層析液中。
(10)濾紙條上色素為何會分離?
由于不同的色素在層析液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的`擴散速度就不同。
(11)色素帶最寬的是什么色素?它在層析液中的溶解度比什么色素大一些?
最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。
(12)濾紙條上相互間距的是哪兩種色素?胡蘿卜素和葉黃素。
(13)色素帶最窄的是第幾條色素帶?為何?
第一條色素帶，因為胡蘿卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。
實驗七觀察質壁分離和復原
1、條件：細胞內外溶液濃度差，活細胞，大液泡
2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞(具紫色大液泡)，質量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。
3、步驟：制作洋蔥鱗片葉外表皮細胞臨時裝片→觀察→蓋玻片一側滴蔗糖溶液，另一側用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小，顏色由淺變深，原生質層與細胞壁分離)→蓋玻片一側滴清水，另一側用吸水紙吸引→觀察(質壁分離復原)
4、結論：細胞外溶液濃度>細胞內溶液濃度，細胞失水質壁分離
細胞外溶液濃度<細胞內溶液濃度，細胞吸水質壁分離復原
知識概要：制片觀察加液觀察加水觀察
考點提示：
(1)洋蔥為何要選紫色的?若紫色過淡怎么辦?
紫色的洋蔥有紫色的大液泡，便于觀察液泡的大小變化;縮小光圈，使視野變暗些。
(2)洋蔥表皮應撕還是削?為何?表皮應撕不能削，因為削的表皮往往太厚。
(3)植物細胞為何會出現質壁分離?動物細胞會嗎?當細胞失去水分時，其原生質層的伸縮性大于細胞壁的伸縮性;動物細胞不會發生質壁分離，因為動物細胞沒有細胞壁。
(4)質壁分離時，液泡大小和顏色的變化?復原時呢?
細胞發生質壁分離時，液泡變小，紫色加深;當細胞質壁分離復原時，液泡變大，紫色變淺。
(5)若發生質壁分離后的細胞，不能發生質壁分離復原，其原因是什么?
細胞已經死亡(可能是外界溶液濃度過大，細胞失水過多或質壁分離時間過長)
(6)高倍鏡使用前，裝片如何移動?
若要把視野中上方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續向上移動。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續向左方移動，因為顯微鏡視野中看到的是倒像。
(7)換高倍物鏡后，怎樣使物像清晰?視野明暗度會怎樣變化?如何調亮?換高倍物鏡后，應調節細準焦螺旋使物像變得清晰;視野會變暗，可調大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。
(8)所用目鏡、物鏡的長度與放大倍數的關系?目鏡越長，放大倍數越小;物鏡越長，放大倍數越大。
(9)物像清晰后，物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數的.關系?
物鏡與載玻片之間的距離越小，放大倍數越大。
(10)總放大倍數的計算方法?放大倍數具體指面積的放大倍數還是長度的放大倍數?
總放大倍數等于目鏡放大倍數與物鏡放大倍數的乘積;放大倍數是指細小物體長度或寬度的放大倍數。
(11)放大倍數與視野中細胞大小、多少、視野明暗的關系?
放大倍數越大，視野中細胞越大、數目越少、視野越暗。
(12)更換目鏡，若異物消失，則異物在目鏡上;更換物鏡，若異物消失，則異物在物鏡上、移動載玻片，若異物移動，則異物在載玻片上。
(13)怎樣利用質壁分離現象來測定植物細胞液的濃度?①配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液②分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細胞的臨時裝片③用顯微鏡觀察某植物細胞是否發生質壁分離。某植物細胞液的濃度就介于不能引起質壁分離的濃度和能引起質壁分離的濃度之間。
微生物學實驗報告 10
一、實驗目的
1. 學會提取和分離葉綠體中色素的方法。
2. 比較、觀察葉綠體中四種色素：理解它們的特點及與光合作用的關系
二、實驗原理
光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上，而葉綠體中的色素能溶于有機溶劑
中。故要提取色素，要破壞細胞結構，破壞葉綠體膜，使基粒片層結構直接與有機溶劑接
觸，使色素溶解在有機溶劑中。
葉綠體中的色素有四種，不同色素在層析液(脂溶性強的有機溶劑)中的溶解度不同，
因而隨層析液的擴散速度也不同。
三、材料用具
取新鮮的`綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養皿、毛細吸管、量筒、有機溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。
四、實驗過程（見書Ｐ54）
1.提取色素：
2.制備濾紙條：
3.色素分離，紙層析法。（不要讓濾液細線觸及層析液）
4.觀察：
層析后，取出濾紙，在通風處吹干。觀察濾紙條上出現色素帶的數目、顏色、位置和寬窄。結果是：4條色素帶從上而下依次是：胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍綠色)、葉綠素b(黃綠色)。
五、討論
1.濾紙條上的濾液細線為什么不能接觸到層析液？
2.提取和分離葉綠體中色素的關鍵是什么？
微生物學實驗報告 11
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞：顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片，及其他細胞裝片。
一、目的：
在實驗過程中為學生提供多種細胞裝片，以供學生操作、觀察，增加了學生動手實驗的時間，使學生在實驗中經歷調節顯微鏡的焦距的過程，從而熟練掌握教學教學顯微鏡的使用方法。
二、步驟：
1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座，把顯微鏡向著光放在實驗臺上。
2、對光：轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔。
3、調節載物臺下的反光鏡，從目鏡往下看，能看見亮的光圈。
4、觀察：調節粗準焦螺旋，把所要觀察的.洋蔥表皮切片放在載物臺上，用壓片夾夾住，標本要正對通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內看，同時轉動粗準焦螺旋等，直到看清切片上的細胞為止，最后整理器材。
三、注意事項：
1、取送顯微鏡時，應右手握住鏡臂，左手托住鏡座，輕拿輕放。
2、鏡檢時，坐姿端正，一般用左眼觀察物象，用右眼看著實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。
3、切忌一面從目鏡進行觀察，一面使鏡筒下降，這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調節焦距時，切勿使用粗調節器，以免壓壞標本，損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒，移開鏡頭后再取出玻片標本，以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。
微生物學實驗報告 12
一、實驗目的
1.初步學會探索酶的催化效率的`方法。
2.探索過氧化氫酶和Fe3+催化效率的高低。
二、實驗原理
新鮮的豬肝中含有過氧化氫酶，Fe3+是一種無機催化劑，它們都可以催化過氧化氫分解
成水和氧
三、材料用具
質量分數為20%的新鮮豬肝漿、滴管、試管、火柴、試管架、質量分數為3.5%的氯化鐵溶液、體積分數為3%的'過氧化氫溶液。
四、實驗過程（見書Ｐ30）
五、討論
實驗中選擇新鮮的豬肝是因為新鮮的豬肝中的酶活性較高，能夠更有效地催化反應。另外，新鮮的豬肝也能保證實驗結果的可靠性和準確性。在滴入豬肝研磨液和氯化鐵溶液時，不可以公用一個吸管。這是因為兩種液體中可能含有不同的物質，通過公用一個吸管會導致交叉污染，影響實驗結果的準確性和可靠性。
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