生物實驗報告

時間：2025-02-20 16:19:48 詩琳實驗報告我要投稿

生物實驗報告（通用27篇）

　　在當下社會，報告對我們來說并不陌生，其在寫作上有一定的技巧。你所見過的報告是什么樣的呢？下面是小編為大家整理的生物實驗報告，歡迎閱讀，希望大家能夠喜歡。

生物實驗報告（通用27篇）

　　生物實驗報告 1

　　一、實驗目的

　　1. 初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法。

　　2. 理解植物細胞發生滲透作用的原理。

　　二、實驗原理

　　當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞液中的水分就透過原生質層進入外界溶液中，使細胞壁和原生質層都出現一定的收縮。由于原生質層比細胞壁的收縮性大，當細胞不斷失水時，原生質層就會與細胞壁逐漸分離開，也就是分升了質壁分離當細胞液的`濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分就透過原生質層進入細胞液中，整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態，使植物細胞逐漸發生質壁分離復原。

　　三、材料用具

　　紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液

　　四、實驗過程(見書P60)

　　物理實驗報告 ——化學實驗報告 ——生物實驗報告 ——實驗報告格式 ——實驗報告模板

　　五、討論

　　1.如果將洋蔥表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的蔗糖溶液中，這些表皮細胞會出現什么現象?

　　2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發生質壁分離現象?為什么?

　　3.畫一個細胞在正常狀態下到經過0.3g/ml蔗糖溶液處理，再經過清水處理的細胞變化的一系列模式圖。

　　生物實驗報告 2

　　一、實驗目的

　　1. 學會提取和分離葉綠體中色素的方法。

　　2. 比較、觀察葉綠體中四種色素：理解它們的特點及與光合作用的`關系

　　二、實驗原理

　　光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上，而葉綠體中的色素能溶于有機溶劑

　　中。故要提取色素，要破壞細胞結構，破壞葉綠體膜，使基粒片層結構直接與有機溶劑接

　　觸，使色素溶解在有機溶劑中。

　　葉綠體中的色素有四種，不同色素在層析液(脂溶性強的有機溶劑)中的溶解度不同，

　　因而隨層析液的擴散速度也不同。

　　三、材料用具

　　取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養皿、毛細吸管、量筒、有機溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。

　　四、實驗過程（見書Ｐ54）

　　1.提取色素：

　　2.制備濾紙條：

　　3.色素分離，紙層析法。（不要讓濾液細線觸及層析液）

　　4.觀察：

　　層析后，取出濾紙，在通風處吹干。觀察濾紙條上出現色素帶的數目、顏色、位置和寬窄。結果是：4條色素帶從上而下依次是：胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍綠色)、葉綠素b(黃綠色)。

　　五、討論

　　1.濾紙條上的濾液細線為什么不能接觸到層析液？

　　2．提取和分離葉綠體中色素的關鍵是什么？

　　生物實驗報告 3

　　一、實驗室規則

　　1．實驗前應認真預習實驗指導，明確實驗目的和要求，寫出預實驗報告。

　　2．進入實驗室必須穿白大衣。嚴格遵守實驗課紀律，不得無故遲到或早退。不得高聲說話。嚴禁拿實驗器具開玩笑。實驗室內禁止吸煙、用餐。

　　3．嚴格按操作規程進行實驗。實驗過程中自己不能解決或決定的問題，切勿盲目處理，應及時請教指導老師。

　　4．嚴格按操作規程使用儀器，凡不熟悉操作方法的儀器不得隨意動用，對貴重的精密儀器必須先熟知使用方法，才能開始使用；儀器發生故障，應立即關閉電源并報告老師，不得擅自拆修。

　　5．取用試劑時必須“隨開隨蓋”，“蓋隨瓶走”，即用畢立即蓋好放回原處，切忌“張冠李戴”，避免污染。

　　6．愛護公物，節約水、電、試劑，遵守損壞儀器報告、登記、賠償制度。

　　7．注意水、電、試劑的使用安全。使用易燃易爆物品時應遠離火源。用試管加熱時，管口不準對人。嚴防強酸強堿及有毒物質吸入口內或濺到別人身上。任何時候不得將強酸、強堿、高溫、有毒物質拋灑在實驗臺上。

　　8．廢紙及其它固體廢物嚴禁倒入水槽，應倒到垃圾桶內。廢棄液體如為強酸強堿，必須事先用水稀釋，方可倒入水槽內，并放水沖走。

　　9．以實事求是的科學態度如實記錄實驗結果，仔細分析，做出客觀結論。

　　實驗失敗，須認真查找原因，而不能任意涂改實驗結果。實驗完畢，認真書寫實驗報告，按時上交。

　　10．實驗完畢，個人應將試劑、儀器器材擺放整齊，用過的玻璃器皿應刷洗干凈歸置好，方可離開實驗室。值日生則要認真負責整個實驗室的清潔和整理，保持實驗整潔衛生。離開實驗室前檢查電源、水源和門窗的安全等，并嚴格執行值日生登記制度。

　　二、實驗報告的基本要求

　　實驗報告通過分析總結實驗的結果和問題，加深對有關理論和技術的理解與掌握，提高分析、綜合、概括問題的能力，同時也是學習撰寫研究論文的過程。

　　1．實驗報告應該在專用的生化實驗報告本上、按上述格式要求書寫。

　　2．實驗報告的前三部分①實驗原理、②實驗材料（包括實驗樣品、主要試劑、主要儀器與器材）、③實驗步驟（包括實驗流程與操作步驟）要求在實驗課前預習后撰寫，作為實驗預習報告的內容。預習時也要考慮并設計好相應實驗記錄的表格。

　　3．每項內容的基本要求

　　（1）實驗原理：簡明扼要地寫出實驗的原理，涉及化學反應時用化學反應方程式表示。

　　（2）實驗材料：應包括各種來源的生物樣品及試劑和主要儀器。說明化學試劑時要避免使用未被普遍接受的商品名和俗名。試劑要標清所用的濃度。

　　（3）實驗步驟：描述要簡潔，不能照抄實驗講義，可以采用工藝流程圖的方式或自行設計的表格來表示，但對實驗條件和操作的關鍵環節應寫清楚，以便他人重復。

　　（4）實驗記錄：包括主要實驗條件、實驗中觀察到的現象及實驗中的原始數據。

　　（5）結果（定量實驗包括計算）：應把所得的實驗結果（如觀察現象）和數據進行整理、歸納、分析、對比，盡量用圖表的形式概括實驗的結果，如實驗組與對照組實驗結果的比較表等(有時對實驗結果還可附以必要的.說明)。

　　（6）討論：不應是實驗結果的重述，而是以結果為基礎的邏輯推論。如對定性實驗，在分析實驗結果的基礎上應有中肯的結論。還可以包括關于實驗方法、操作技術和有關實驗的一些問題，對實驗異常結果的分析和評論，對于實驗設計的認識、體會和建議，對實驗課的改進意見等。

　　（7）結論：一般實驗要有結論，結論要簡單扼要，說明本次實驗所獲得的結果。

　　三、實驗報告的評分標準（百分制）

　　1．實驗預習報告內容（30分）

　　學生進入實驗室前應預習實驗，并書寫預習報告。實驗預習報告應包括以下三部分： ①實驗原理（10分）：要求以自己的語言歸納要點；②實驗材料（5分）：包括樣品、試劑及儀器。只列出主要儀器、試劑（常規材料不列）；③實驗方法（15分）：包括流程或路線、操作步驟，要以流程圖、表格式給出要點，簡明扼要。依據各部分內容是否完整、清楚、簡明等，分以下三個等級給分。

　　優秀：項目完整，能反映實驗者的加工、整理、提煉。

　　合格：較完整，有一定整理，但不夠精煉。

　　不合格：不完整、缺項，大段文字，完全照抄教材，記流水賬。

　　實驗預習報告不合格者，不允許進行實驗。該實驗應重新預約，待實驗室安排時間后方可進行實驗。

　　2．實驗記錄內容（20分）

　　實驗記錄是實驗教學、科學研究的重要環節之一，必須培養嚴謹的科學作風。

　　實驗記錄的主要內容包括以下三方面：①主要實驗條件（如材料的來源、質量；試劑的規格、用量、濃度；實驗時間、操作要點中的技巧、失誤等，以便總結實驗時進行核對和作為查找成敗原因的參考依據）；②實驗中觀察到的現象（如加入試劑后溶液顏色的變化）；③原始實驗數據：設計實驗數據表格（注意三線表格式），準確記錄實驗中測得的原始數據。記錄測量值時，要根據儀器的精確度準確記錄有效數字（如吸光值為0.050，不應寫成0.05），注意有效數字的位數。

　　實驗記錄應在實驗過程中書寫；應該用鋼筆或者圓珠筆記錄，不能用鉛筆。記錄不可擦抹和涂改，寫錯時可以準確劃去重記。記錄數據時請教師審核并簽名。

　　實驗記錄分以下三個等級給分。

　　優秀：如實詳細地記錄了實驗條件、實驗中觀察到的現象、結果及實驗中的原始數據（如三次測定的吸光度值）等；實驗記錄用鋼筆或者圓珠筆記錄，沒有抹擦和涂改跡象。書寫準確，表格規范（三線表）。有教師的簽字審核。

　　合格：記錄了主要實驗條件，但不詳細、凌亂；實驗中觀察到的現象不細致；原始數據無涂改跡象，但不規范。有教師的簽字審核。

　　不合格：記錄不完整，有遺漏；原始數據有抹擦和涂改跡象、捏造數據（以0分計）；圖、表格形式錯誤；用鉛筆記錄原始數據；無教師的簽字審核。若記錄的結果有懷疑、遺漏、丟失，必須重做實驗，培養嚴謹的科學作風。

　　3．結果與討論（45分）

　　（1）數據處理（5分）

　　對實驗中所測得的一系列數值，要選擇合適的處理方法進行整理和分析。數據處理時，要根據計算公式正確書寫中間計算過程或推導過程及結果，得出最終實驗結果。要注意有效數字的位數、單位（國際單位制）。經過統計處理的數據要以X〒SD表示。可分成以下三個等級給分。

　　優秀：處理方法合理，中間過程清楚，數據格式單位規范。

　　合格：處理方法較合理，有中間計算過程；數據格式單位較規范。

　　不合格：處理方法不當；無中間過程；有效數字的位數、單位不規范。

　　（2）結果（20分）

　　實驗結果部分應把所觀察到的現象和處理的最終數據進行歸納、分析、比對，以列表法或作圖法來表示。同時對結果還可附以必要的說明。

　　要注意圖表的規范：表格要有編號、標題；表格中數據要有單位（通常列在每一列頂端的第一行或每一行左端的第一列）。圖也要有編號、標題，標注在圖的下方；直角坐標圖的縱軸和橫軸要標出方向、名稱、單位和長度單位；電泳圖譜和層析圖譜等要標明正、負極方向及分離出的區帶、色帶或色斑的組分或成分。電泳結果還要標記泳道，并在圖題下給出泳道的注釋；要標出分子量標準的各條帶的大小。并且注意需要結合圖表對結果進行較詳細的解釋說明。

　　可分成以下三個等級給分。

　　優秀：實驗結果有歸納、解釋說明，結果準確，格式規范。

　　合格：堆砌實驗現象、數據，解釋說明少。

　　不合格：最終實驗結果錯誤且無解釋說明，圖表、數字不規范。

　　（3）討論（20分）

　　討論應圍繞實驗結果進行，不是實驗結果的重述，而是以實驗結果為基礎的邏輯推論，基本內容包括：①用已有的專業知識理論對實驗結果進行討論，從理論上對實驗結果的各種資料、數據、現象等進行綜合分析、解釋，說明實驗結果，重點闡述實驗中出現的一般規律與特殊性規律之間的關系。

　　生物實驗報告 4

　　實驗日期：年月日

　　組長：組員：

　　一、實驗要求

　　1、練習使用顯微鏡，學習規范的操作方法。

　　2、能夠獨立操作顯微鏡。

　　3、能夠將玻片標本移動到視野中央，并看到清晰的圖像。

　　二、實驗原理

　　三、材料用具

　　顯微鏡，寫有“上”字的玻片，動物、植物玻片標本，擦鏡紙，紗布。

　　四、方法與步驟

　　（一）取鏡和安放

　　1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座

　　2、把顯微鏡放在實驗臺上，略偏左。安裝好目鏡和物鏡。

　　（二）對光

　　3、轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔（物鏡的`前端與載物臺要保持2厘米的距離）。

　　4、把一個較大的光圈對準通光孔。左眼注視目鏡內（右眼睜開，便于以后同時畫圖）。轉動反光鏡，使光線通過通光孔反射到鏡筒內。通過目鏡，以看到白亮的視野。

　　（三）觀察

　　5、把所要觀察的玻片標本（也可以用印有“e”字的薄紙片制成）放在載物臺上，用壓片夾壓住，標本要正對通光孔的中心。

　　6、轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩下降，直到物鏡接近玻片標本為止（眼睛看著物鏡，以免物鏡碰到玻片標本）。

　　7、左眼向目鏡內看，同時反方向轉動粗準焦螺旋，使鏡筒緩緩上升，直到看清物像為止。再略微轉動細準焦螺旋，使看到的物像更加清晰。

　　注意事項：

　　1、實驗完畢，把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉動轉換器，把兩個物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進鏡箱里，

　　生物實驗報告 5

　　一、實驗目的：

　　1、掌握顯示細胞中過氧化物酶反應的原理和方法。2.了解細胞凋亡的生物學意義

　　3、掌握凋亡細胞的形態學檢測方法

　　二、實驗原理：

　　1、細胞內的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯苯胺處理標本，細胞內的過氧化物酶能把聯苯胺氧化為藍色的聯苯胺藍，進而變為棕色產物，因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的有無或多少。中間產物藍色聯苯胺是不穩定的，無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。

　　2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下，遵循自身的程序，自己結束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的，基因控制的，一系列酶參與的過程。

　　3、凋亡細胞形態學特征是:體積變小,細胞質濃縮;細胞核發生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的.凋亡小體;根據細胞凋亡形態學特征進行顯微觀察是檢測細胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。

　　三、實驗步驟：

　　細胞中過氧化物酶的顯示

　　1、在載片上滴一滴PBS緩沖液；

　　2、取骨髓細胞：用斷頸法處死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剝出后肢股骨，剪開股骨一端，用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中，摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上；

　　3、涂片：用另一玻片將骨髓細胞沿一個方向涂布推開，室溫晾干；

　　4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸銅液，以蓋滿涂片為宜，處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液，直接滴入聯苯胺混合液反應6分鐘（以蓋滿涂片為宜）6、清水沖洗，番紅復染2min。

　　7、鏡檢：清水沖洗，室溫晾干，先低倍鏡下觀察，后換高倍鏡下觀察（油鏡100×）

　　細胞凋亡的形態學檢測與觀察吉姆薩染色:

　　1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞3、95%乙醇固定5min

　　4、PBS緩沖液洗2次

　　5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

　　7、普通光學顯微鏡下觀察。吖啶橙染色:

　　1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞

　　3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min

　　5、0.01%吖啶橙染色液在避光環境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

　　6、選用藍光激發濾片在熒光顯微鏡下觀察。

　　四、結果與分析：

　　1、根據隨機選擇的幾個視野的統計，該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9

　　Hela細胞凋亡過程中核染色質的形態變化（吖啶橙染色）

　　五、思考題：

　　1、細胞凋亡的調控機制

　　細胞凋亡是一個受基因調控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動自殺過程，其觸發因素多種多樣，包括細胞內誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調控。

　　2、細胞凋亡的特征

　　凋亡細胞形態學特征是:體積變小,細胞質濃縮;細胞核發生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。

　　3、研究細胞凋亡的方法

　　定性的研究方法：常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察（普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）

　　定量或半定量的研究方法：各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

　　生物實驗報告 6

　　實驗名稱：用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動

　　一、實驗目的

　　1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。

　　2.觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態和分布

　　二、實驗原理

　　高等植物的葉綠體呈橢球狀，在不同的光照條件下，葉綠體可以運動，改變橢球體的向，這樣既能接受較多的光照，又不至于被強光灼傷。在強光下，葉綠體以其橢球體的側面朝向光源；在弱光下，葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此，在不同光照條件下采集的葫蘆蘚，其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。

　　活細胞中的細胞質處于不斷的流動狀態，觀察細胞質的流動，可以用細胞質基質中的葉綠體的.運動做為標志。

　　三、材料用具

　　蘚類的葉，新鮮的黑藻，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，刀片，培養皿，鉛筆

　　四、實驗過程(見書p30)

　　1.制作蘚類葉片的臨時裝片

　　2.用顯微鏡觀察葉綠體

　　3.制作黑藻葉片臨時裝片

　　4.用顯微鏡觀察細胞質流動

　　五、討論

　　1.細胞質基質中的`葉綠體是否靜止不動，為什么?

　　2.葉綠體的形態和分布與葉綠體的功能有什么關系?

　　3.植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態，這對于活細胞完成生命活動有什么意義?

　　4.用鉛筆畫一個葉片細胞，標出葉綠體的大致流動方向。

　　生物實驗報告 7

　　實驗名稱：

　　觀察洋蔥表皮細胞。

　　實驗目的：

　　1、學習制作洋蔥表皮玻片標本。

　　2、學會使用顯微鏡觀察洋蔥表皮，用圖畫記錄觀察到的洋蔥表皮細胞。

　　3、對比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。

　　實驗重點：

　　用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　實驗難點：

　　正確使用顯微鏡。

　　實驗準備：

　　分組實驗器材：顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。

　　實驗過程：

　　一、導入課題

　　出示洋蔥。問：如果從它的內表皮上揭下一塊，用顯微鏡來觀察能看到些什么呢？（板書課題）

　　二、制作洋蔥表皮玻片標本

　　1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標本的方法與步驟。

　　（1）在一個干凈的玻璃載片中間滴一滴清水；

　　（2）用小刀在洋蔥鱗葉片內壁劃一個“井”字，用鑷子取下“井”中洋蔥內表皮放到載玻片的水滴中央，注意標本要平展開，不能折疊；

　　（3）用蓋玻片傾斜著蓋到標本上面，放蓋玻片時，先放一端，再慢慢放下另一端，注意不要有氣泡。如水不足，可沿蓋玻片邊緣滴加；若水分過多，可用吸水紙吸掉；

　　（4）從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒，并把玻片微微傾斜，再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水；

　　（5）洋蔥表皮玻片標本做成可進行觀察。

　　2、學生以組為單位自制玻片標本（最好制三份裝片，便于下面的對比觀察），教師巡視指導（教育學生注意安全）。

　　三、觀察洋蔥表皮細胞

　　1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內容畫在科學記錄本上。

　　2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內容畫到科學記錄本上。

　　3、學生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么？它們有何不同？

　　4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　（1）、出示顯微鏡，引導學生認識顯微鏡，簡介各部分的名稱、功能及使用方法，學生每5人一組操作熟悉顯微鏡。

　　（2）、各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。（師操作演示：安放――對光――上片――調焦――觀察。生一步步跟著操作。）

　　（3）、學生觀察、記錄、描畫洋蔥表皮細胞。教師巡視指導，各組的實驗組長監督組員操作是否規范，要求每個人都要操作、都要觀察，并將觀察結果進行交流。組長將大家在顯微鏡下的發現畫到科學記錄本上。

　　5、全班交流在顯微鏡下的發現。

　　（1）各組推薦發言代表談自己的發現。

　　（2）各組將所畫的觀察結果向全班展示。

　　（3）交流討論評價。

　　6、師小結：我們發現放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的`細節更多，更清楚。我們發現洋蔥表皮是由一個個比較規則的多邊形組成的，而且大多呈長方形，外為細胞壁，內為無色細胞質和細胞核。洋蔥表皮上的一個個小房間似的結構，就是洋蔥的細胞。（師一邊描述一邊畫洋蔥細胞簡圖）

　　四、實驗結束。

　　回收實驗器材，整理實驗桌。

　　生物實驗報告 8

　　一、實驗目的

　　1. 初步學會探索酶催化特定化學反應的方法。

　　2. 探索淀粉酶是否只能催化特定的`化學反應。

　　二、實驗原理

　　淀粉和蔗糖都是非還原糖，它們在酶的.催化作用下都能水解成還原糖，還原糖能夠與斐林試劑發生氧化還原反應，生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。

　　用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液，再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖，就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學反應。

　　三、材料用具

　　滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網、酒精燈、燒杯、質量分數為2%的新鮮淀粉酶溶液、質量分數為3%的可溶性淀粉溶液、質量分數為3%的蔗糖溶液、斐林試劑

　　四、實驗過程（見書Ｐ47）

　　五、討論

　　1.制備的可溶性淀粉溶液，必須完全冷卻后才能使用。為什么？

　　2.兩支試管保溫時，為什么要控制在60 ℃左右(低于50 ℃或高于75 ℃)?

　　3.如果2號試管也產生了磚紅色沉淀，可能是由哪些原因造成的？

　　生物實驗報告 9

　　一、實驗目的：

　　1、學會如何使用顯微鏡觀察細胞；

　　2、了解細胞的結構；

　　3、學會制作臨時裝片。

　　二、實驗材料：

　　（實驗材料可換）松針、動物血液、動物神經細胞永久裝片

　　三、實驗用具：

　　載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡（物鏡5X、10X、40X）

　　四、方法步驟：

　　1、制作松針的臨時切片：

　　（1）取干凈的載玻片一個平置于試驗臺上，用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。

　　（2）將土豆切成條狀（截面約：0.5X0.5cm)取兩條，將一根松針夾在兩個土豆條之間，用刀片削成盡量薄的薄片，削時，手腕不動，靠大臂帶動小臂移動刀片。切片數次。從中選取較薄的切片，置于載玻片的水滴上。

　　（3）從一側輕輕蓋上蓋玻片，不要產生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周圍的.水滴，即完成臨時切片的制作。

　　2、觀察切片：

　　（1）取出顯微鏡，置于試驗臺上靠左的位置，打開光源。

　　（2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的載物臺上，調整載物臺位置，使蓋玻片對準光源。

　　（3）使用5X物鏡觀察切片，使松針切片在視野中心，換成10X物鏡，觀察松針葉面橫切結構。

　　（4）換成40X物鏡觀察，注意細胞及細胞內物質結構，畫圖。

　　3、動物血液臨時裝片的`制作及觀察（除了不用切片，其他類似）

　　4、動物神經細胞永久裝片的觀察。

　　五、反思：

　　1、松針的葉面結構是什么樣的？

　　2、動物細胞的結構是什么樣的？與植物細胞又什么不同？

　　3、顯微鏡的物鏡倍數愈大，視野的亮度如何？物體的大小如何？

　　4、如何調節焦距？

　　5、如何才能使切片盡量的薄？切片的厚薄對顯微鏡下觀察的效果有什么影響。

　　生物實驗報告 10

　　一、實驗目的

　　初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。

　　二、實驗原理

　　1.還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多，常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內都含有還原性基團(游離醛基或游離酮基)，因此叫做還原糖。蔗糖的分子內沒有游離的半縮醛羥基，因此叫做非還原性糖，不具有還原性。本實驗中，用斐林試劑只能檢驗生物組織中還原糖存在與否，而不能鑒定非還原性糖。

　　斐林試劑由質量濃度為0.1g/ml的氫氧化鈉溶液和質量濃度為0.05g/ml的硫酸銅溶液配制而成，二者混合后，立即生成淡藍色的cu(oh)2沉淀。cu(oh)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下，能夠生成磚紅色的cu2o沉淀，而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應式如下：

　　ch2oh—(choh)4—cho+2cu(oh)2→ch2oh—(choh)4—cooh+cu2o↓+2h2o

　　用斐林試劑鑒定還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色棕色磚紅色(沉淀)。

　　2.蛋白質的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質量濃度為0.1g/ml的氫氧化鈉溶液(a)和質量濃度為0.01g/ml(b)的`硫酸銅溶液。在堿性溶液(naoh)中，雙縮脲(h2noc—nh—conh2)能與cu2+作用，形成紫色或紫紅色的絡合物，這個反應叫做雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的.肽鍵，因此，蛋白質可與雙縮脲試劑發生顏色反應。

　　3.脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色，被蘇丹Ⅳ染成紅色

　　三、實驗過程(見書p18)

　　四、實驗用品(見書p18)

　　五、注意

　　1.關于鑒定還原糖的實驗，在加熱試管中的溶液時，應該用試管夾夾住試管上部，并放入盛開水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部，同時試管口不要朝向實驗者，以免試管內溶液沸騰時沖出試管，造成燙傷。如果試管內溶液過于沸騰，可以上提試管夾，使試管底部離開大燒杯中的開水。

　　2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用，切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

　　3.蛋白質的鑒定中先加雙縮脲a，再加雙縮脲b

　　六、討論

　　鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質的根據是什么?

　　生物實驗報告 11

　　一、實驗目的：

　　1、掌握顯示細胞中過氧化物酶反應的原理和方法。

　　2、了解細胞凋亡的生物學意義

　　3、掌握凋亡細胞的形態學檢測方法

　　二、實驗原理：

　　2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下，遵循自身的程序，自己結束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的，基因控制的.，一系列酶參與的過程。

　　3、凋亡細胞形態學特征是：體積變小，細胞質濃縮；細胞核發生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化)；細胞膜有小泡狀形成；晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體；根據細胞凋亡形態學特征進行顯微觀察是檢測細胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。

　　三、實驗步驟：

　　細胞中過氧化物酶的顯示

　　1、在載片上滴一滴PBS緩沖液；

　　3、涂片：用另一玻片將骨髓細胞沿一個方向涂布推開，室溫晾干；

　　4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸銅液，以蓋滿涂片為宜，處理30秒-1分鐘。

　　5、傾去硫酸銅液，直接滴入聯苯胺混合液反應6分鐘（以蓋滿涂片為宜）

　　6、清水沖洗，番紅復染2min。

　　7、鏡檢：清水沖洗，室溫晾干，先低倍鏡下觀察，后換高倍鏡下觀察（油鏡100×）

　　細胞凋亡的形態學檢測與觀察吉姆薩染色：

　　1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)

　　2、生理鹽水輕輕漂洗細胞

　　3、95%乙醇固定5min

　　4、PBS緩沖液洗2次

　　5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液

　　7、普通光學顯微鏡下觀察。

　　吖啶橙染色：

　　1、取細胞爬片置于小培養皿中(有細胞面朝上)

　　2、生理鹽水輕輕漂洗細胞

　　3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min

　　4、PBS緩沖液洗2次每次1min

　　5、0.01%吖啶橙染色液在避光環境下染色5min

　　6、蒸餾水輕輕洗去染液

　　6、選用藍光激發濾片在熒光顯微鏡下觀察。

　　四、結果與分析：

　　1、根據隨機選擇的幾個視野的統計，該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9

　　2、Hela細胞凋亡過程中核染色質的形態變化（吖啶橙染色）

　　五、思考題：

　　1、細胞凋亡的調控機制

　　2、細胞凋亡的特征

　　凋亡細胞形態學特征是：體積變小，細胞質濃縮；細胞核發生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化)；細胞膜有小泡狀形成；晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。

　　3、研究細胞凋亡的方法

　　定性的研究方法：常規瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態學觀察（普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）

　　定量或半定量的研究方法：各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。

　　生物實驗報告 12

　　一、實驗目的

　　1.觀察植物細胞有絲分裂的過程，識別有絲分裂的不同時期。

　　2.初步掌握制作洋蔥根尖有絲分裂裝片的技能。

　　3.初步掌握繪制生物圖的方法。

　　二、實驗原理

　　在植物體中，有絲分裂常見于根尖、莖尖等分生區細胞，高等植物細胞有絲分裂的`過程，分為分裂間期和分裂期的前期、中期、后期、末期。可以用高倍顯微鏡觀察植物細胞的有絲分裂的過程，根據各個時期細胞內染色體(或染色質)的變化情況，識別該細胞處于有絲分裂的哪個時期，細胞核內的染色體容易被堿性染料著色。

　　三、材料用具

　　洋蔥根尖、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、培養皿、鉛筆、質量分數為15%的.鹽酸、體積分數為95%的酒精、質量分數為0.01g/ml的龍膽紫(或紫藥水)

　　四、實驗過程(見書p39)

　　1.洋蔥根尖的培養(提前3—4天)

　　2.解離：5min

　　3.漂洗：10min

　　4.染色：5min

　　5.制片

　　6.鏡檢

　　五、注意

　　1.解離充分是實驗成功的必備條件。解離充分，組織才能分散，細胞也不會重疊。

　　2.漂洗時間一定要足夠，否則細胞染不上色。

　　3.染色時，染液的濃度和染色時間必須掌握好。特別是染色不能過深，否則鏡下一片紫色，無法觀察。

　　六、討論

　　1.制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關鍵是什么?談談你自己的體會。

　　2.在觀察清楚有絲分裂各個時期的細胞以后，繪出洋蔥根尖細胞有絲分裂的簡圖，并標明時期。

　　生物實驗報告 13

　　一、實驗目的

　　了解細胞膜[1]的滲透性及各類物質進入細胞的速度[2]

　　二、實驗原理

　　1、在等滲溶液中，細胞對各種溶質的透過性不同。有的溶質可以進入，有的溶質不能滲入。

　　2、滲入的溶質能提高細胞的滲透壓，促進水分子進入細胞，引起溶血現象。

　　3、不同的溶質滲入到細胞內的速度不同，因此溶血時間也不同。

　　三、實驗材料

　　新鮮血液（雞血、豬血、牛血等）

　　四、實驗器材

　　試管（1.5cmX18cm）、試管架、10ml移液管、1ml移液管、200ml燒杯（2個）、250ml容量瓶、移液槍、膠頭滴管、菜刀、吸球、電子天平、顯微鏡、蓋玻片、載玻片、秒表

　　五、實驗藥品及試劑

　　0.17MNaCl、0.17MNH4Cl、0.17MNH4Ac、0.17MNaNO3、0.12MNa2SO4、0.12M草酸銨、0.32M葡萄糖、0.32M甘油、0.32M乙醇、0.32M丙酮、肝素抗凝劑[4]

　　六、實驗步驟

　　1、制備血液稀釋液

　　（1）抗凝劑的制備：首先稱取1克肝素鈉粉末，然后加入0.17MNaCl溶液10ml（1∶10的比例），混合均勻，制成肝素抗凝劑。

　　（2）血液稀釋液的制備：取新鮮血液，按比例（肝素抗凝劑：血液=1∶10）混合均勻，配制成經肝素抗凝的血液[5][6]。

　　（3）按比例（經肝素抗凝的血液∶0.17MNaCl溶液=1∶10）混合均勻，形成一種不透明的紅色液體[7]。

　　2、低滲溶液（空白對照）的觀察

　　取試管一只，加入10ml蒸餾水，然后再加入1ml稀釋的血液。注意觀察溶液顏色的變化。結果是溶液由不透明的紅色變為澄清。記錄下這個過程所要的時間。

　　3、紅血球的滲透性

　　按表一的配制，分別在下列十種等滲溶液中進行實驗。輕輕搖動，注意有無顏色變化，是否有溶血現象發生，記下時間（自加入稀釋血液到溶液逐漸由紅色變為透明澄清，紅血球全部溶血所需時間），填入表一的空格中。

　　4、顯微觀察

　　[1]何為細胞膜？[5]注意：這一步，動作要非常迅速，否則雞血會凝固。或者先把抗凝劑加入到燒杯中，再加入新鮮的[2]雞血，邊加邊震蕩即可。為何不同物質進入細胞的速度不同？[6]為什么新鮮的.雞血會凝固？[3]何為溶血現象？[7]為什么這一步要使用0.17M的NaCl溶液？[4]你知道有哪些血液抗凝劑？

　　（1）血液紅細胞的觀察

　　滴一滴稀釋的血液于載玻片上，蓋上蓋玻片。用光學顯微鏡觀察細胞的種類、形狀和顏色。

　　（2）細胞破碎的觀察

　　在上一步的載玻片的一端滴加清水，在另一端吸水，并在顯微鏡下觀察細胞的破裂。

　　七、實驗結果與分析

　　1、比較和分析你所觀察到的實驗結果，并解釋原因。

　　結果：

　　（1）在所提供的試劑中不溶血的有：

　　（2）在所提供的試劑中不完全溶血的有：

　　（3）在所提供的試劑中完全溶血的有：

　　結果分析與比較：結論：

　　2、繪制你所觀察到的血液細胞圖。

　　3、討論溶血實驗在研究中應用的可能性。

　　生物實驗報告 14

　　一、【實驗目的】

　　1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質粒DNA的原理和方法。

　　2、學習并掌握凝膠電泳進行DNA的分離純化的實驗原理。

　　3、學習并掌握凝膠的制備及電泳方法。

　　4、學習并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。

　　二、【實驗原理】

　　1、質粒DNA的制備方法

　　質粒（Plasmid）是獨立存在于染色體外、能自主復制并能穩定遺傳的一種環狀雙鏈DNA分子，分布于細菌、放線菌、真菌以及一些動植物細胞中，但在細菌細胞中含量最多。細菌質粒大小介于1～200Kb之間，是應用最多的質粒類群，在細菌細胞內它們利用宿主細胞的復制機構合成質粒自身的DNA。

　　質粒DNA的制備包括3個步驟：

　　①培養細菌，使質粒DNA大量擴增；

　　②收集和裂解細菌；

　　③分離和純化質粒DNA。主要方法包括：堿裂解法：0.2molNaOH+1%SDS；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；SDS裂解法：10%SDS，一般用于質粒大量提取。在實際操作中可以根據宿主菌株類型、質粒分子大小、堿基組成和結構等特點以及質粒DNA的用途進行選擇。本實驗選擇堿裂解法提取質粒DNA。

　　2、質粒DNA的提取——堿變性提取法

　　在細菌細胞中，染色體DNA和質粒DNA均被釋放出來，但是兩者變性與復性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達12.0的堿性溶液中，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性；共價閉合環狀質粒DNA的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補鏈不完全分離。因為它們在拓撲學上是相互纏繞的。當用pH值4.6的KAc（NaAc）高鹽溶液調節堿性溶液至中性時，變性的質粒DNA可恢復原來的共價閉合環狀超螺旋結構而溶解于溶液中；但染色體DNA不能復性，而是與不穩定的大分子RNA、蛋白質—SDS復合物等一起形成纏連的、可見的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過離心，與復性的溶于溶液的質粒DNA分離。溶于上清液的質粒DNA，可用無水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質類似，乙醇沉淀DNA的同時，也伴隨著RNA沉淀，可利用RNaseA將RNA降解。質粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白，可通過酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質粒DNA。

　　3、凝膠電泳進行DNA分離純化

　　電泳（electrophoresis）是帶電物質在電場中向著與其電荷相反的電極方向移動的現象。各種生物大分子在一定pH條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場中會向相反的電極移動。凝膠是支持電泳介質，它具有分子篩效應。含有電解液的凝膠在電場中，其中的電離子會發生移動，移動的速度可因電離子的大小形態及電荷量的不同而有差異。利用移動速度差異，就可以區別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段，是分子生物學的核心技術之一。

　　凝膠電泳技術操作簡單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，EB）或SYBR Gold染色直接觀察到，甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發下也能直接檢測到。需要的話，這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實驗。

　　分子生物學中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構型和方位進行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質電泳。它的分辨率非常高，長度上相差1bp或質量上相差0.1%的DNA都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進行DNA序列分析的分子基礎。雖然它能很快地進行電泳，并能容納較大的DNA上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長鏈狀多聚物，由β—D—吡喃半乳糖與3，6—脫水—L—吡喃半乳糖組成，相對分子質量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬bp），小片段DNA（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場中水平方向的瓊脂糖凝膠內電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測定DNA的相對分子質量，分離經限制酶水解的DNA的片段，進一步純化DNA等。

　　瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負電荷，在電場中向正極移動。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個因素：樣品DNA分子的大小、DNA分子的構象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場、緩沖液和溫度。

　　三、【實驗材料】

　　1、實驗儀器

　　培養皿、接種環、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養箱、50ml離心管、1.5ml塑料離心管（Eppendorf管）、高速離心機、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛生紙和記號筆、手套等。

　　2、實驗試劑

　　LB培養基，抗生素Ap（氨芐青霉素），溶液Ⅰ，溶液Ⅱ，溶液Ⅲ，RNaseA母液，TE緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（PCI）混合液，預冷無水乙醇，TAE電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（EB），DNA相對分子質量標準物DNA Marker λ/Hind Ⅲ，5mol/L pH 5.2的`醋酸鈉。

　　四、【實驗步驟】

　　1、準備實驗

　　配制LB液體培養基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配LB固體培養基；準備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1.5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個，將上述物品包好連同配好的培養基一同滅菌。

　　2、菌體培養

　　在含有Ap的LB平板上挑取一環攜帶有質粒pUC19的E。coli DH5單菌落，接種于20mlLB液體培養基中進行37℃振蕩過夜培養，培養基中加Ap100ul

　　（100ug/ml），質粒pUC19具有Ap抗性基因，使得帶有pUC19的質粒得以生長。過夜培養后菌體量大，雜質較多，然后用移液槍吸取過夜培養物2ml轉接于50mlLB液體培養基中，培養基中加入Ap250ul，37℃振蕩培養4—6h至對數生長期后期，生長速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質少，適合提取質粒。

　　3、質粒提取

　　（1）稱量空的50ml離心管的'重量為14.331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒滿，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細胞。

　　（2）向離心管中懸滴加入5ml冰預冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱重得14.437g，則菌體質量為106mg。

　　（3）洗滌后每100mg菌體應加入冰預冷的溶液Ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液Ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使

　　溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細胞提前破裂，防止DNA受機械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價金屬離子的螯合劑，可抑制DNase的活性，抑制微生物的生長。Tris—Cl溶液提供適當的pH。

　　（4）按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml（與溶液Ⅰ對應），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細胞膜發生了從bilayer（雙層膜）結構向micelle（微囊）結構的相變化導致細胞溶解。同時，強堿性使染色體DNA、質粒DNA和蛋白質變性；SDS為下一步沉淀做鋪墊。

　　（5）按比例加入冰預冷的溶液Ⅲ1.5ml（與溶液Ⅰ、Ⅱ對應），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質SDS復合物、細胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH，因為長時間的堿性條件會打斷基因組DNA，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被PDS共沉淀。同時變性的質粒DNA復性。反應形成的高鹽環境進一步加速了沉淀。

　　（6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側，用移液槍將上清液轉移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻，加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會起任何化學反應，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態穩定存在，當加入乙醇時，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中，DNA分子是帶負電荷的，加一定濃度的NaAc或NaCl，易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。

　　（7）以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。

　　（8）以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質粒呈淺黃色，隨著水分的減少質粒變為無色。所以為了完全溶解質粒，要在離心管上標記質粒所在位置。

　　（9）將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉移到一個Eppendorf管中。TE是pH緩沖液，為DNA提供穩定的生理狀態，呈弱堿性，有利于保護堿基對。同時含有EDTA是二價陽離子的螯合劑，抑制DNA酶作用。

　　4、質粒純化

　　（1）Eppendorf管中加入RNase A（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0.5—1h

　　（2）將上述的溶液平均分配到2個1.5ml的微量離心管中，每管0.5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）Tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經Tris飽和后的，顯黃色。苯酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無色，在中間產生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質。

　　（3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強的蛋白變性劑，但是苯酚留在質粒溶液中會影響DNA的酶切，它本身易被氧化，會損傷質粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質粒中的脂類，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過程中出現的泡沫，有利于分層更明顯。此時溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質的存在。

　　（4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉移到一潔凈的Eppendorf管中，得上清液400ul。

　　（5）向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻，再加入2倍體積的冰無水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。

　　（6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到DNA沉淀，為白色。

　　（7）向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部DNA沉淀所在面應與收集沉淀面一致。

　　（8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。

　　5、質粒檢測

　　（1）稱取0.4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標好液面位置，加入40ml的1×TAE電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補充在溶膠過程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。

　　（2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進電泳槽內。在槽內加入1×TAE 電泳緩沖液，至液面覆蓋過膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。

　　（3）電泳1h，觀察溴酚蘭的帶（藍色）的移動。

　　（4）把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進EB溶液中進行染色，完全浸泡約5min。

　　（5）凝膠成像儀觀察。

　　五、【注意事項】

　　（1）滴加溶液II時，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動作要快，因為強堿在溶液中停留時間不能過長，否則會破壞質粒DNA。

　　（2）加入溶液III后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液III中和強堿使質粒復性，不可劇烈震蕩，防止染色體DNA斷裂，應該上下顛倒離心管，使其混勻。

　　生物實驗報告 15

　　一、實驗目的：

　　1、通過對原核和真核各種形態細胞的光學顯微鏡觀察，了解細胞的形態及其顯微結構；

　　2、學習顯微測量的方法，對細胞的大小有一直觀認識。

　　二、實驗材料和儀器：

　　小白鼠肝細胞切片；雞血紅細胞；蠶豆葉片橫切片；

　　普通光學顯微鏡；目鏡測微尺；鏡臺測微尺；載玻片；蓋玻片。

　　三、實驗步驟：

　　(一)細胞形態觀察

　　l、動物細胞的觀察

　　（1）人肝細胞切片：在顯微鏡下仔細觀察肝細胞的形態構造。

　　（2）雞血細胞涂片的觀察：觀察血細胞的組成；紅細胞、白細胞、血小板的形態特點。

　　2、植物細胞的觀察

　　取蠶豆葉片橫切片的觀察：注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。

　　（二）細胞的大小和測量

　　1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上，再旋上目鏡的`上透鏡。

　　2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好，使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。

　　3、小心移動鏡臺測微尺和轉動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊，可轉動目鏡上透鏡進行調焦)，使兩尺左邊的一直線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的'直線。

　　4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm：

　　鏡臺測微尺的格數

　　目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10

　　目鏡測微尺的格數

　　四、實驗結果：

　　1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24

　　2、細胞大小的測量：

　　五、作業與思考：

　　1、血細胞按含量高低，主要含有：紅細胞，白細胞，血小板。

　　白細胞最大，紅細胞次之，血小板最小。紅細胞：主要的功能是運送氧。白細胞：主要扮演了免疫的角色，當病菌侵入人體時，白細胞能穿過毛細血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過程中起著重要作用。

　　2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態圖見下。

　　3、在不同放大倍數下，測定的細胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍數越大，在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大，而更容易測量準確。

　　生物實驗報告 16

　　一、實驗目的

　　1.初步學會探索酶催化特定化學反應的方法。

　　2.探索淀粉酶是否只能催化特定的.化學反應。

　　二、實驗原理

　　淀粉和蔗糖都是非還原糖，它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖，還原糖能夠與斐林試劑發生氧化還原反應，生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。

　　用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液，再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖，就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學反應。

　　三、材料用具

　　四、實驗過程

　　（見書Ｐ47）

　　五、討論

　　1.制備的可溶性淀粉溶液，必須完全冷卻后才能使用。為什么？

　　２.兩支試管保溫時，為什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?

　　3.如果2號試管也產生了磚紅色沉淀，可能是由哪些原因造成的？

　　生物實驗報告 17

　　一、實驗名稱：

　　用顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞

　　二、實驗材料：

　　顯微鏡、洋蔥表皮細胞切片，及其他細胞裝片。

　　三、實驗步驟：

　　1、右手握住鏡臂，左手托住鏡座，把顯微鏡向著光放在實驗臺上。

　　2、對光：轉動轉換器，使低倍物鏡對準通光孔。

　　3、調節載物臺下的反光鏡，從目鏡往下看，能看見亮的光圈。

　　4、觀察：調節粗準焦螺旋，把所要觀察的洋蔥表皮切片放在載物臺上，用壓片夾夾住，標本要正對通光孔的中央。

　　5、左眼向目鏡內看，同時轉動粗準焦螺旋等，直到看清切片上的細胞為止，最后整理器材。

　　四、使用注意事項：

　　1、取送顯微鏡時，應右手握住鏡臂，左手托住鏡座，輕拿輕放。

　　2、鏡檢時，坐姿端正，一般用左眼觀察物象，用右眼看著實驗報告紙畫圖。兩眼須同時睜開。

　　3、切忌一面從目鏡進行觀察，一面使鏡筒下降，這樣容易使物鏡與玻片標本碰撞而損壞。

　　4、在高倍鏡下調節焦距時，切勿使用粗調節器，以免壓壞標本，損壞物鏡。

　　5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒，移開鏡頭后再取出玻片標本，以免取玻片時擦損鏡頭的鏡面。

　　五、實驗原理：

　　利用教學顯微鏡觀察洋蔥表皮細胞。

　　六、創新點：

　　在實驗過程中為學生提供多種細胞裝片，以供學生操作、觀察，增加了學生動手實驗的.時間，使學生在實驗中經歷調節顯微鏡的焦距的過程，從而熟練掌握教學教學顯微鏡的使用方法。

　　生物實驗報告 18

　　一、課題的提出

　　創新時代賦予教育創新使命，綜合高考要求呼喚綜合創新能力培養。深化素質教育改革，加強綜合創新能力培養是對數干年的“應試+科舉”式的傳統教育模式的拼棄。盡管經過了現代化教育思想和理論的說孔，但仍存在部分教師教學觀念和方法比較陳舊，尤其是創新意識創新實踐在教學中使用缺乏足夠的認識。古今中外的教育家創立了不少有效的教學方法，為我們借鑒應用，提供了充分的條件。我們在運用教學方法時，做到內容與形式的統一，根據教材不同性質的內容和學生的實際情況，運用不同的教學方法，挖掘教材中創新的教育資源，加強創新教育研究，使教學方法具有靈活性、多樣性和創造性。

　　二、課題的實驗目標

　　1、明確實現高中生物課程目標：養成實事法語是的科學態度，養成勇于探索不斷創新的精神與合作精神。發展比較、判斷、推理、分析、綜合等思維能力，初步形成創造性思維品質和創新意識，能夠運用學到的生物學知識評價和解決某些實驗問題。

　　2、確立高中生物綜合創新教育模式。

　　3、通過實驗研究，全組教師樹立正確的教育思想，加強學習，不斷進行知識創新，能力創新，勇于探索，能利用各種現代化教學手段和現有實驗條件進行綜合創新，教育研究，全面提高業務素質和教學效果。

　　三、實驗過程

　　㈠實驗對象

　　我們采用隨機抽樣方法，選取成績一般的兩個班作為實驗班級。

　　㈡實驗內容：

　　1、采用生動活潑，靈活多樣的教學手段和教學方法，引導學生自主學習，自主探索，誘發學生對生物學的興趣和求異創新的思維火花，逐步形成一套適合高中生心理和思維特點的新的教學模式。

　　2、開展STS教育實驗。針對高考改革的要求，聯合社會發展，熱點問題及生產生活實際，讓學生了解關心社會發展與科技進步，激發創新欲望。用談話法、討論法、實驗法及分析兩部大開發，環境污染、疾病與健康等熱點問題，提高學生創造性地解決問題的能力。

　　3、高二生物課將研究性學習作為教材改革的主要內容之一。充分利用現有實驗器材與設備，校園中生物基地，培養學生合作學習、合作研究的精神，使學生得到實踐鍛煉的機會和直接的創新體驗，增強創新意識，培養創新情感，提高創新能力。

　　4、高三生物復習中主要是加強綜合問題的研究，注意知識的滲透融合，是實現知識綜合化、系統化、網絡化，培養綜合創新能力的有效手段。

　　㈢實驗方法

　　本課題的研究采用以實驗研究為主的方法，輔之以經驗總結法、文獻法和調查分析法，同時注意了資料的積累與分析，總結出研究報告一份，成果有論文、總結及創新教育實便資料多件。

　　㈣實驗步驟

　　1、準備階段：我們首先注意優化課堂教學結構，突出實驗創新內容的安排。確定試點班級與實驗教師，擬定實驗方案，形成初其數據資料。為實驗順利進行提供良好物質基礎。

　　2、實施階段：收集整理資料，加強理論學習，通過不同途徑指導學生創新實踐。

　　⑴實施實驗變量和控制無關變量。其中自變量：科學合理地指導學生的創新實踐活動，固變量：提高學生學習興趣和操作技能，全面提高學生創造性地解決問題的創新思維和創新能力。教師、學生、教學條件既是實驗研究的自變量和固變量，也是影響實驗效果的相關變量，在實驗中，不斷排除不列于實驗研究開展和影響實驗信度的干擾因素，由教師在實驗班中施行實驗內容，作用于實驗對象。

　　⑵測試。在每節實驗課里，對課堂教學效果進行跟蹤測試。

　　①觀察：由實驗教師對學生的課堂行為進行觀察記錄、統計。主要觀察學生對教學內容是否感興趣。

　　②測量：包括達標測試，課前安排好內容，操作熟練者為達標。

　　在實施階段，教師邊實驗、邊學習、邊研究、邊小結，每兩周舉行一節觀摩課，積累典型課例，豐富創新教育素材。

　　3、總結階段

　　按實驗方案進行總結、整理資料，統計分析數據，匯編成果目錄、積累成功實踐的素材，為進一步擴大實驗研究成果，更好地開展創新實踐做好物質準備。

　　四、實驗成果

　　㈠構建了高中生物實驗教學與研究性學習自學輔導模式：

　　在原有的`課堂教學中，一貫是教師講，學生聽，實驗課上教師講，學生做。在課堂上學生始終處于被動地位，喪失了探索、求知的學習主動性。沒有做過的'實驗學生就束手無策，研究性學習更是無從下手，不會設計。為此，我們提出在教學基礎知識訓練基本技能時注重啟發誘導學生自我探索，自行學習，最后形成新技能這一自學輔導模式。培養了學生自我學習的能力和對生物不斷探索的強烈欲望。

　　教學模式可根據具體研究的內容與主題，所采取的研究手段等構建。如“酸雨對植物的影”一課采用創設情景提出問題小組討論實地觀測數據分析反饋應用的模式；“植物對水分的吸收”一課采用確定目標提出假設實驗研究結果分析歸納總結的模式。構建教學模式必須注意以下幾個要素；

　　①學生主體性的體現要充分；

　　②教師的指導作用要明確；

　　③學生研究的層次要分明；

　　④要有利于培養學生的創新精神和團隊合作精神。

　　探究式教學模式的一般操作框架如圖：

　　㈡激發了學生的求知欲望，提高了學生的探究能力

　　實驗班學生通過一年多的探究實踐，對實驗與研究性學習內容有了強烈的興趣，教育生活化，生活課題化，學生從生活和社會實踐中尋找研究性學習的材料。如《校園植物資源調查》、《校園生態綠化方案設計》、《家用洗衣粉與河水污染》、《酸雨的危害調查》等。在施教過程中，綜合了各學科知識，利用校園網和校內外的現有資源培養學生的創新精神和實踐能力。不同學生對同一課題設計方案比較分析中，優化探究方法是開發學生思維空間的好辦法，探究活動中給予學生充分的活動空間和表現空間，為學生創新意識的激發及創新能力的培養提供必要的保障，為優化師生關系，實施創新教育落實素質教育，邁出堅實的步伐，在省生物學奧林匹克競賽中有2人獲省級獎，6人獲市級獎勵，高二生物實驗操作考試通過率100%，成績在同類學校中名列前茅。

　　㈢教師的業務能力有了一定提高

　　通過實驗和總結，我們取得了一些開展研究性學習和指導學生探究實踐的經驗和方法，實驗教師提高了業務能力豐富了教育思想，我們的教研課多次受到了市縣教研室領導及兄弟學校同仁的好評。使我校生物教學邁上了一個新的臺階。已發表論文5篇，校級交流刊出多篇，在20xx~20xx學年度高三生物三次市統考中，我校生物均分在全縣完中分別列第二名、第二名、第一名。呈現穩步上升態勢。三位教師在市專業技能比賽中獲獎。

　　五、課題研究的成效與思考

　　1、利用現有校內外資源條件，結合教材中的有關內容，拓展學生思維空間，進行實驗探究活動，對學生個性的張揚具有獨特價值；對于培養學生探究意識和終身學習能力，為學生個性的發展提供廣闊的空間是切實可行的，也是行之有效的。

　　2、課題的研究主要是專題性研究，為我們采用開放式，滾動式管理模式開發校本課程，開展更富有創造性的探索，最大限度地發揮學生的主動性提供了可資借鑒的經驗。

　　3、受人力限制，教師課時多，對于學生個別輔導，全面提高方面還有一定的發展空間，有待于我們把研究成果進一步推向深入。

　　生物實驗報告 19

　　實驗三：

　　觀察人體口腔上皮細胞

　　目的要求：

　　1、制作和觀察人體口腔上皮細胞的臨時裝片

　　2、認識人體口腔上皮細胞的結構

　　3、熟練畫細胞結構圖

　　材料用具：

　　顯微鏡、吸水紙、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、碘液、鑷子、紗布、漱口杯、牙簽

　　方法步驟

　　（一）制作人口腔上皮細胞的臨時裝片

　　1、用紗布擦凈載玻片、蓋玻片（很薄，應輕擦）

　　2、在載玻片中央滴一滴生理鹽水（0.9%），說明：為什么用0.9%的生理鹽水，觀察洋蔥表皮裝片用清水，都是為了讓細胞所處的環境和它們所生活的'環境相同，不至于脹破或變形，使細胞保持原狀。

　　3、漱凈口。目的：將口腔的飯粒清除，以保證所取的細胞純度。

　　4、用牙簽在口腔內壁輕劃幾下，將上面附有碎屑涂抹在生理鹽水中，盡量涂均勻。

　　5、蓋蓋玻片。用鑷子夾起蓋玻片，使它的一側先接觸載玻片的水滴，然后慢慢放平（注意：避免產生氣泡）。

　　6、染色。

　　①在蓋玻片一側滴加稀碘液，

　　②用吸水紙在蓋玻片另一側吸引，使染液浸潤標本的全部。

　　（二）用顯微鏡觀察。

　　使用顯微鏡

　　①安放

　　②對光

　　③放置玻片標本，調節焦距，用眼觀察，在視野中會看到被染成桔黃色的上皮細胞、

　　（三）繪圖：

　　人體口腔上皮細胞模式圖

　　（四）整理：清潔玻片，廢物放在指定位置。

　　歸納討論：人的口腔上皮細胞有哪些基本結構，植物細胞和動物細胞相同和不同之處。答：人的口腔上皮細胞的基本結構有細胞膜、細胞質和細胞核；植物細胞與動物細胞相比，細胞壁、葉綠體和液泡是植物細胞特有的。

　　實驗時間：20xx年9月27日

　　生物實驗報告 20

　　一、實驗目的

　　1. 學會提取和分離葉綠體中色素的方法。

　　2. 比較、觀察葉綠體中四種色素：理解它們的特點及與光合作用的關系

　　二、實驗原理

　　光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上，而葉綠體中的色素能溶于有機溶劑中。故要提取色素，要破壞細胞結構，破壞葉綠體膜，使基粒片層結構直接與有機溶劑接觸，使色素溶解在有機溶劑中。

　　葉綠體中的色素有四種，不同色素在層析液(脂溶性強的.有機溶劑)中的溶解度不同，因而隨層析液的擴散速度也不同。

　　三、材料用具

　　四、實驗過程（見書Ｐ54）

　　1.提取色素：

　　2.制備濾紙條：

　　3.色素分離，紙層析法。（不要讓濾液細線觸及層析液）

　　4.觀察：

　　五、討論

　　1.濾紙條上的濾液細線為什么不能接觸到層析液？

　　2.提取和分離葉綠體中色素的關鍵是什么？

　　生物實驗報告 21

　　實驗教師：

　　xxx

　　所在學校：

　　xxx中學

　　目的要求：

　　1練習徒手切片

　　2認識葉片的結構

　　3畫葉片的表皮細胞和保衛細胞

　　材料用具：

　　新鮮葉片（如菠菜、槐樹、蠶豆的葉片），顯微鏡，雙面刀片（兩片、并在一起、一側用膠布粘牢）、鑷子、載玻片、蓋玻片、葉片的永久切片、盛有清水的培養皿、滴管、吸水紙、碘液、紗布、毛筆、小木板。

　　方法步驟

　　方法與步驟要點

　　注意事項

　　（一）練習徒手切片，制作葉片橫切片的臨時切片

　　1將新鮮的葉片平放在小木板上。

　　2右手捏緊并排的兩片刀片，沿著圖中虛線的方向，迅速切割。

　　3把刀片夾縫中存在的切下的薄片放入盛有清水培養皿中。要多切幾次（每切一次，刀片要蘸一下水）。

　　4用毛筆蘸出最薄的一片，制成臨時切片。葉片下面要墊上小塊木板，以防損壞桌面。刀片要捏緊，切割速度要快，注意安全。

　　為了便于觀察，載玻片的水滴中可以同時放幾片葉的橫切片，選擇切得最薄的一片用來觀察。

　　（二）觀察葉片的結構

　　1.用顯微鏡先觀察葉片橫切面的'`臨時切片，再觀察葉片的永久橫切片。

　　2.觀察時注意分清時的表皮、葉肉和葉脈。

　　仔細觀察上、下表皮細胞的區別

　　（三）觀察葉片的下表皮

　　1.用鑷子撕下一小塊葉片的下表皮，制成臨時裝片。

　　2.用顯微鏡進行觀察，下表皮細胞的形態是什么樣子的，下表皮上有沒有氣孔？

　　撕取下表皮時，一定要薄，否則影響觀察效果。

　　注意觀察氣孔的結構。

　　（四）畫圖

　　在下面空白處畫出下表皮上一對保衛細胞及周圍的幾個表皮細胞，這一對保衛細胞要詳細畫，周圍的細胞只需勾出輪廓。

　　畫圖時，要真實、實事求是。

　　討論與交流

　　1.保衛細胞的結構特點對植物的蒸騰作用有什么意義？

　　2.從結構上看，葉片有哪些方面是適于接受陽光的？

　　生物實驗報告 22

　　【探究內容】

　　探究種子萌發的環境條件

　　【探究目的】

　　１、了解種子萌發需要的環境條件。

　　２、學會進行探究實驗的一般方法。

　　【探究器材】

　　種子100粒、5個能蓋緊的罐頭瓶、小勺一個、餐巾紙10張、標簽紙5張

　　【探究過程】

　　提出問題：光的強弱會對種子萌發產生影響嗎？水的多少會對種子的萌發產生影響嗎？溫度的高低會對種子萌發產生影響嗎？空氣的流通會對種子萌發產生影響嗎？

　　做出假設：光的強弱、水的多少、溫度的高低都會對種子的萌發產生一定的影響。

　　制定計劃：準備100顆綠豆種子，5個有蓋的瓶子，10張紙巾，5張便利貼。1號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，放在空氣流通，有陽光的地方；2號瓶的水不但能濕透紙巾，而且能把種子淹沒，放在空氣流通，有陽光的.地方；3號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，用蓋子把瓶子蓋上，使瓶子空氣不能流通；4號瓶的水只能濕透紙巾，并不能淹沒種子，放在冰箱里，盡量使瓶子里的水不結冰；5號瓶不放水，放在空氣流通，有陽光的地方。

　　實施計劃：每天都進行實驗并觀察5個瓶子有什么變化，再把每天的變化都紀錄下來。

　　分析結果：1號瓶大部分能發芽；2號瓶的種子皮破了，但不能發芽；3號瓶只有少許發了芽；4號瓶和5號瓶沒有發芽

　　得出結論：想要種子發芽，一定要有適宜的光度；需要適量的水分，溫度也要控制好，空氣的流通也有一定的影響，但影響沒有光度、水分和溫度大，相對來說，空氣流通的影響較小。

　　這個實驗很簡單，我們在做實驗要分以上幾步完成，就會很容易的完成實驗。

　　【交流與評估】

　　1、根據你的問題和假設，應當將種子分成幾組？XX每組應有多少粒種子？XX每組只有一粒種子可以嗎？

　　2、對照組應提供的溫度、水分、空氣等條件應該如何？

　　3、每個實驗組的處理，除了所研究的條件外，其他環境條件是否應與對照組相同？

　　生物實驗報告 23

　　一、實驗目的

　　1、熟悉常用微生物培養基（牛肉膏蛋白胨培養基）的配制方法。

　　2、學習各種無菌操作技術，并用此技術進行為微生物稀釋分離、劃線分離接種。

　　3、用平板劃線法和稀釋涂布平板發分離微生物。

　　4、認識為微生物存在的普遍性，體會無菌操作的重要性。

　　5、掌握分離產淀粉酶微生物的試驗方法和步驟，了解產淀粉酶的微生物種類及形態。

　　二、實驗原理

　　土壤是微生物生活的大本營，是尋找和發現有重要應用潛力的微生物的主要菌源。不同土樣中各類微生物數量不同，一般土壤中細菌數量最多，其次為放線菌和霉菌。一般在較干燥，偏堿性、有機質豐富的土壤中放線苗數量較多；酵母菌在一般土壤中的數量較少，而在水果表皮、葡萄園、果園土中數量多些。本次實驗從土壤中分離產淀粉酶的微生物，應該取那些富含產淀粉酶的微生物的土樣。從復雜的微生物群體中獲得只含有一種或某一類型微生物的過程稱為微生物的分離與純化。常用的方法有

　　1、簡單單細胞挑取法

　　2、平板分離法和稀釋涂布平板法

　　此次實驗采取的是平板分離法和稀釋涂布平板法結合，該方法操作簡單，普遍用于微生物的分離與純化。其原理包括：

　　1)稀釋后的細胞懸液圖不在平板上可以分離得單個菌株

　　2)在適合于待分離微生物的生長條件（如營養、酸堿度、溫度與氧等）下培養微生物，或加入某種抑制劑造成只利于待分離微生物的生長，而抑制其他微生物生長的環境，從而淘汰一些不需要的微生物。

　　3)微生物在固體培養基上生長形成的單個菌落可以是由一個細胞繁殖而成的集合體。因此可通過挑取單菌落而獲得純培養。獲得單菌落的方法可通過稀釋涂布平板或平板劃線等方法完成。

　　以淀粉作為惟一碳源的培養基培養未分離細菌，能產淀粉酶的.細菌能生長，且菌落周圍出現透明圈（淀粉不透明，被消化后變透明），則產淀粉酶微生物被分離出來。本實驗采用透明圈檢驗法檢測培養物中是否有產淀粉酶微生物的生長。

　　三、實驗儀器及試劑

　　1、器材：

　　培養皿、載玻片、蓋玻片、普通光學顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、燒杯、三角瓶、酒精燈、玻璃棒、接種環、鑷子、恒溫培養箱、高壓蒸汽滅菌鍋、、天平、濾紙、pH試紙等。

　　2、試劑：

　　配制牛肉膏蛋白胨培養基的原料（牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白胨）、淀粉、盧戈氏碘液、蒸餾水、250ml三角瓶中裝90ml無菌水加20粒玻璃珠，作稀釋用等。

　　3、土樣：

　　取自貴州大學農生樓后土壤10g，地下10cm左右。

　　四、實驗步驟：

　　1、配制牛肉膏蛋白胨培養基：

　　1）配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基400ml（用于11個平皿和7支試管斜面）牛肉膏0.5%…………………………………2g

　　蛋白胨1%……………………………………4g

　　NaCl0.5%…………………………………..2g

　　瓊脂2%……………………………………..8g

　　淀粉0.5%........................................2g

　　pH……………………………………7.0~7.2

　　（2）無菌水的制備

　　分別取9ml蒸餾水加入5支試管中，加塞后用報紙包扎捆綁，放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌備用。取90ml蒸餾水加入250ml三角瓶中，同樣的操作，滅菌備用。

　　（3）器皿的準備

　　將刻度吸管用報紙包扎，培養皿裝入專用滅菌杯分別放入高溫滅菌箱滅菌備用。

　　2）倒11個平板和7支試管斜面，包扎，0.1Mp、121℃、滅菌30min.

　　2、制備土壤稀釋液：

　　稱取土樣10g，放入盛有250ml無菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中，振蕩搖勻10min使土和水充分混合，然后用移液槍從三角瓶中吸取1ml（此操作要求無菌操作），加入另一盛有9ml無菌水的試管中，混合均勻，以此類推分別制成制成0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001不同稀釋度的土壤溶液。

　　3、涂布培養：

　　0.00001、0.000001濃度的土壤稀釋液作為涂布平板培養的對象，將其分別涂布在3個牛肉膏蛋白胨培養基中，共6個培養基，標號，37°C溫箱培養48h。

　　4、選取目的菌株：

　　兩天后對土壤溶液的微生物培養基進行觀察，并取兩個菌落形態完全一致的分散的單個菌落，對其中一個噴灑盧戈氏碘液，觀察其菌落周圍是否出現透明圈，如果出現透明圈說明此菌株產淀粉酶，是目的菌株，記錄細菌明顯的性狀。

　　生物實驗報告 24

　　一、實驗目的

　　1. 初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法。

　　2. 理解植物細胞發生滲透作用的原理。

　　二、實驗原理

　　當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞液中的水分會通過原生質層進入外界溶液，導致細胞壁和原生質層收縮。由于原生質層的收縮性較大，隨著細胞不斷失水，原生質層逐漸與細胞壁分離，形成質壁分離。當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分透過原生質層進入細胞液，使原生質層逐漸恢復原狀，植物細胞逐漸發生質壁分離的`復原過程。

　　三、材料用具

　　紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液

　　四、實驗過程（見書ｐ60）

　　物理實驗報告 ·化學實驗報告 ·生物實驗報告 ·實驗報告格式 ·實驗報告模板

　　五、討論

　　1. 如果把洋蔥表皮細胞浸泡在與細胞液等滲的蔗糖溶液中，這些細胞會發生質壁分離現象。

　　2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發生質壁分離現象？為什么？

　　3.繪制一組模式圖，描述一個細胞在正常狀態下，經過處理后的變化。首先將細胞放入0.3g/ml蔗糖溶液中處理，然后再經過清水處理。

　　生物實驗報告 25

　　實驗目的：

　　（1）了解培養基的配置原理和方法，掌握分離培養微生物的有關準備工作。

　　（2）掌握高壓滅菌方法及原理

　　實驗原理：

　　（1）培養基的制備原理：

　　培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。

　　從營養角度分析：

　　營養：碳源、氮源、能源、生長素、水分和無機鹽等；?適宜的酸堿度(pH值)和一定緩沖能力；?一定的氧化還原電位；?合適的滲透壓。

　　瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反復融化，其凝固性降低。

　　（2）濕熱滅菌原理－高壓蒸汽滅菌

　　在密閉的蒸鍋內，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內溫

　　度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。

　　實驗材料與方法

　　配制培養基所需器材

　　實驗設備：高壓蒸汽滅菌器。

　　實驗器材：500ml三角燒瓶、藍蓋瓶、5ml刻度吸管、培養基、天平、砝碼、

　　稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。

　　培養基等集中放講臺前高壓桶內，送到洗刷室統一高壓滅菌條件及注意事項

　　高壓滅菌條件：121.3℃，15min。含糖培養基113℃，15min。

　　倒平板電爐加熱滅菌好的培養基打開平皿包裝倒平板（10塊）注意事項：空氣環境無菌（應在酒精燈火焰周圍無菌區）。

　　a.在酒精燈火焰處，傾斜打開瓶口。

　　b.瓶口要過火焰。

　　c.左手掀開平皿小口。

　　d.傾注滿皿底再多一點，約10ml（7cm直徑平皿）。

　　e.推放一邊要輕緩，不能晃起瓊脂掛壁，易在培養過程中污染雜菌。

　　f.完全凝固再翻轉平板放塑料筐內，4℃備用。

　　分析與討論

　　（1）如何證明培養基滅菌是否徹底?

　　把滅菌后的培養基按滅菌鍋內的不同位置，每處抽取數管(瓶)，標上記號，置25℃～30℃培養一周左右進行檢查。如果培養基沒有什么變化，說明滅菌效果良好；如果某一位置的培養基出現了雜菌菌落，可能是擺放的'太緊，導致蒸汽不暢，或鍋的結構不合理等原因所致，應根據上述情況進行改進；如果大部分或全部菌種瓶都出現雜菌，說明滅菌溫度或滅菌時間不夠，應提高壓力或延長滅菌時間。經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后，以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。

　　經過幾次檢驗都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進行檢查。

　　（2）為什么說消毒與滅菌是微生物學和臨床醫學必不可少的基本知識?由于病原生物廣泛存在于自然界，可通過不同途徑和媒介進入人體，引起感染或造成疾病流行。因此，殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物，對于切斷傳播途徑、預防和控制其感染具有重要意義。自古以來，人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物，達到預防疾病的目的。實際上，除了在臨床醫療實踐中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物學實驗室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產等過程中都需要避免微生物的污染。

　　生物實驗報告 26

　　實驗目的與要求：

　　掌握霉菌與酵母菌的接種與培養方法。

　　實驗原理：

　　接種是微生物實驗及科學研究中一項基本操作技術。根據實驗目的和要求，

　　選擇合適的接種工具與接種方法，接種工具有接種環、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有：斜面接種，液體接種，穿刺接種，平板接種和固體接種。接種的'`關鍵是無菌操作。

　　無菌操作的原則：在酒精燈火焰旁進行，所有器皿均須嚴格消毒，培養基應事先做無菌試驗，

　　接種工具使用前后須經火焰燒灼滅菌，棉塞不能亂放，始終夾在手指中。在培養四大類微生物時應注意選擇適宜的培養條件。多數細菌為專性需氧菌與兼性需氧菌，少數為厭氧菌。多數食品腐敗菌和工業用菌種，以及人和動物病原菌的最適生長溫度為37℃，并且在近中性（PH6.5～7.5）條件下生長良好。多數放線菌為好氧菌，少數為厭氧菌，最適生長溫度為28～30℃，多數適宜在偏堿性環境中生長（PH7.5～8.5）。

　　實驗材料與方法

　　（1）實驗材料：實驗設備：溫箱。

　　實驗器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無菌蓋玻片、無菌濾紙、無菌載玻片、石棉網、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。

　　（2）實驗方法：平板接種：毛霉→PDA平板（點植法）

　　啤酒酵母→PDA平板（五區分離劃線法）青霉、曲霉→PDA平板（連續劃線法）

　　小室載玻片培養法：

　　1、取滅菌后小室平皿。

　　2、取無菌PDA瓊脂薄層平板，用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5～1.0cm2的瓊脂塊，并將其移至培養小室中的載玻片上，制作過程注意無菌。

　　3、用接種環取少量霉菌的孢子接種于培養基四周，用無菌鑷子

　　將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上，并滅菌的20%甘油（用于保持濕度），蓋上皿蓋，標記，置28～30℃培養3～5d

　　糧食產品的平板接種：

　　1.取糧食樣品20g,放入無菌燒杯，加無菌水洗滌，反復10次，棄去水后，將糧粒倒于平皿內備用2.鑷子取糧食種入PDA瓊脂內，每皿可接種5-10粒。