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實驗設(shè)計方案

時間:2022-09-20 09:57:30 設(shè)計方案 我要投稿

實驗設(shè)計方案錦集6篇

  為確保事情或工作高質(zhì)量高水平開展,我們需要提前開始方案制定工作,方案是書面計劃,是具體行動實施辦法細(xì)則,步驟等。方案要怎么制定呢?下面是小編幫大家整理的實驗設(shè)計方案6篇,僅供參考,希望能夠幫助到大家。

實驗設(shè)計方案錦集6篇

實驗設(shè)計方案 篇1

  一、實驗原理

  (1)鑒定實驗設(shè)計的理念:

  某些化學(xué)試劑 + 生物組織中有關(guān)有機(jī)化合產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。

  (2)具體原理:

  ①可溶性還原糖+ 斐林試劑→磚紅色沉淀。

  ②脂肪小顆粒 + 蘇丹Ⅲ染液→橘黃色小顆粒。

  ③蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑→紫色反應(yīng)。

  二、目標(biāo)要求

  初步掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。

  三、重點、難點

  1.重點

  ①初步掌握鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。

  ②通過實驗的操作和設(shè)計培養(yǎng)學(xué)生的動手能力,掌握探索實驗設(shè)計技巧,從而培養(yǎng)創(chuàng)新思維能力。

  2.難點

  根據(jù)此實驗方法、原理,設(shè)計實驗來鑒定常見食物的成分。

  四、實驗材料

  1.可溶性還原糖的鑒定實驗:選擇含糖量較高、顏色為白色或近白色的植物組織,以蘋果、梨為最好。

  2.脂肪的鑒定實驗:選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實驗前浸泡3h~4h)。

  3.蛋白質(zhì)的鑒定實驗:可用浸泡1d~2d的黃豆種子(或用豆?jié){、或用雞蛋蛋白)。

  五、儀器、試劑

  1.儀器:剪刀,解剖刀,雙面刀片,試管,試管架,試管夾,大小燒杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,水浴鍋,研缽,石英砂,紗布,載玻片,蓋玻片,毛筆,吸水紙,顯微鏡。

  2.試劑:①斐林試劑(0.1g/L的NaOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4溶液);②蘇丹Ⅲ染液;③雙縮脲試劑;④ 體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液;⑤蒸餾水。

  六、方法步驟

  1.制備試劑。

  2.可溶性還原糖的鑒定、方法、步驟。

  3.脂肪的鑒定、方法、步驟。

  4.蛋白質(zhì)的鑒定、方法、步驟。

  七、教學(xué)過程

  新課引入:我們在化學(xué)中學(xué)習(xí)過物質(zhì)的鑒定,其原理是被鑒定的物質(zhì)與所用的化學(xué)試劑要么發(fā)生顏色反應(yīng),要么產(chǎn)生沉淀,我們生物學(xué)上也采用此原理,在生物學(xué)中物質(zhì)鑒定的理念是:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。

  新課教學(xué):(具體原理)

  ①可溶性還原糖+ 斐林試劑→磚紅色沉淀。(水浴加熱)

  ②脂肪小顆粒 + 蘇丹Ⅲ染液→橘黃色小顆粒。(要顯微鏡觀察)

  ③蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑→紫色反應(yīng)。(要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液) 今天,我們學(xué)習(xí)鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。

  (一)、還原糖的鑒定

  1、還原糖的鑒定步驟:

  選材: 蘋果:洗凈、去皮、切塊,取5g放如研缽中 制備組織樣液研磨成漿:加石英砂,加5 ml水研磨

  注入組織樣液2ml過濾:將玻璃漏斗插入試管中,漏斗上墊一層紗布

  加斐林試劑:2ml(由斐林試劑甲液和乙液充分混合而成,不能分別加入)

  水浴加熱:煮沸2min

  觀察溶液顏色變化:淺藍(lán)色→棕色→磚紅色。

  2、實驗成功的要點:

  ①還原糖的鑒定實驗:選擇含糖量較高、顏色為白色或近白色的植物組織,以蘋果、梨為最好。

  ②斐林試劑要兩液混合均勻且現(xiàn)配現(xiàn)用。

  斐林試劑的配制過程示意:

  斐林試劑甲液( 0.1 g/ml的 NaOH 溶液) 按一定比例混合均勻

  斐林試劑 斐林試劑乙液( 0.05 g/ml的 CuSO4 ③在鑒定尿液中是否含有葡萄糖時還能用其他那些鑒定方法?

  學(xué)生回答:還可以用斑氏試劑產(chǎn)生磚紅色沉淀;及糖尿試紙據(jù)糖的由少到多產(chǎn)生淺藍(lán)、淺綠、棕或深棕色。

  (二)、脂肪的鑒定

  1、脂肪的鑒定步驟:

  取材:花生種子(浸泡3-4h),將子葉削成薄片

  取理想薄片

  在薄片上滴2-3滴蘇丹Ⅲ染液

  去浮色 制片

  制成臨時裝片

  觀察:先在低倍鏡下,找到材料的脂肪滴,然后,轉(zhuǎn)為高倍鏡觀察。

  結(jié)論:細(xì)胞中的圓形脂肪小顆粒已經(jīng)被染成橘黃色。

  2、實驗成功的要點:

  ①.脂肪的鑒定實驗:選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最好(實驗前浸泡3h~4h)。

  ②該試驗成功的關(guān)鍵是獲得只含有單層細(xì)胞理想薄片。

  ③滴蘇丹Ⅲ染液染液染色2-3min,時間不宜過長,以防細(xì)胞的其他部分被染色。

  (三)、蛋白質(zhì)的鑒定

  1、 蛋白質(zhì)的鑒定步驟:

  結(jié)論:蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)。

  2、實驗成功的要點:

  ①蛋白質(zhì)的鑒定實驗:可用浸泡1d~2d的黃豆種子(或用豆?jié){、或用雞蛋蛋白稀釋液)。

  ②雙縮脲試劑的使用,一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液),再加入雙縮脲試劑B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液)。

  ③還可設(shè)計一只加底物的試管,不加雙縮脲試劑,進(jìn)行空白對照,說明顏色反應(yīng)的引起是蛋白質(zhì)的存在與雙縮脲試劑發(fā)生反應(yīng),而不是空氣的氧化引起。

實驗設(shè)計方案 篇2

  一.實驗?zāi)康?/p>

  1、學(xué)習(xí)從土壤中分離、純化微生物的原理與方法。

  2、學(xué)習(xí)、掌握微生物的鑒定方法。

  3、對提取的土樣進(jìn)行微生物的分離、純化培養(yǎng),并進(jìn)行簡單的形態(tài)鑒定

  二.實驗原理

  α-淀粉酶是一種液化型淀粉酶,它的產(chǎn)生菌芽孢桿菌,廣泛分布于自然界,尤其是在含有淀粉類物質(zhì)的土壤等樣品中。

  從自然界篩選菌種的具體做法,大致可以分成以下四個步驟:采樣、增殖培養(yǎng)、純種分離和性能測定。

  1、采樣:即采集含菌的樣品

  采集含菌樣品前應(yīng)調(diào)查研究一下自己打算篩選的微生物在哪些地方分布最多,然后才可著手做各項具體工作。在土壤中幾乎各種微生物都可以找到,因而土壤可說是微生物的大本營。在土壤中,數(shù)量最多的當(dāng)推細(xì)菌,其次是放線菌,第三霉菌,酵母菌最少。除土壤以外,其他各類物體上都有相應(yīng)的占優(yōu)勢生長的微生物。例如枯枝、爛葉、腐土和朽木中纖維素分解菌較多,廚房土壤、面粉加工廠和菜園土壤中淀粉的分解菌較多,果實、蜜餞表面酵母菌較多;蔬菜牛奶中乳酸菌較多,油田、煉油廠附近的土壤中石油分解菌較多等。

  2、增殖培養(yǎng)(又稱豐富培養(yǎng))

  增殖培養(yǎng)就是在所采集的土壤等含菌樣品中加入某些物質(zhì),并創(chuàng)造一些有利于待分離微生物生長的其他條件,使能分解利用這類物質(zhì)的微生物大量繁殖,從而便于我們從其中分離到這類微生物。因此,增殖培養(yǎng)事實上是選擇性培養(yǎng)基的一種實際應(yīng)用。

  3、純種分離

  在生產(chǎn)實踐中,一般都應(yīng)用純種微生物進(jìn)行生產(chǎn)。通過上述的增殖培養(yǎng)只能說我們要分離的微生物從數(shù)量上的劣勢轉(zhuǎn)變?yōu)閮?yōu)勢,從而提高了篩選的效率,但是要得到純種微生物就必須進(jìn)行純種分離。純種分離的方法很多,主要有:平板劃線分離法、稀釋分離法、單孢子或單細(xì)胞分離法、菌絲尖端切割法等。

  三.實驗材料

  1、器材:

  小鐵鏟和無菌紙或袋(可省)、培養(yǎng)皿8個、載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、無菌水試管5支(每支4.5mL水)、燒杯3個、三角瓶5個、電爐、玻璃棒、接種環(huán)、鑷子、恒溫培養(yǎng)箱、高溫滅菌鍋、移液槍(槍頭10個)、天平、濾紙、pH試紙等。

  2、試劑:

  配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的原料(牛肉膏0.9g、NaCl1.5g、瓊脂4.5g、蛋白胨3.0g)、Lugol氏碘液、可溶性淀粉0.6g、結(jié)晶紫染液、番紅染液、95%乙醇、無菌水等。

  3、土樣:取自桂林師專甲山校區(qū)藥用植物園面的土壤,地下10cm左右。

  四.實驗方法步驟

  1、采集土樣帶上小鐵鏟和無菌袋到土豆地采集較細(xì)碎土壤

  2、樣品稀釋在無菌紙上稱取樣品1g,放入100mL無菌水的三角瓶中,手搖10分鐘使土和水充分混合。用1mL無菌吸管吸取0.5mL注入4.5mL無菌水試管中,梯度稀釋至10-6。

  3、分離用稀釋樣品的同支吸管分別依次從10-6、10-5、10-4樣品稀釋液中,吸取lmL,注入無菌培養(yǎng)皿中,然后倒入滅菌并融化冷至50℃左右的固體培養(yǎng)基,小心搖動冷凝后,倒置于37℃溫箱中培養(yǎng)48小時。培養(yǎng)基的配制—稱取蛋白胨1.0g;NaCl0.5g;牛肉膏0.3g;瓊脂1.5g;pH6.4左右;100ml水定容。

  4、初步鑒定對多種菌進(jìn)行形態(tài)特征的觀察,簡單染色、革蘭氏染色以及芽孢染色觀察,記錄結(jié)果。

  5、α-淀粉酶鑒定

  1)實驗原理:

  細(xì)菌能否產(chǎn)生α-淀粉酶主要依據(jù)是鑒定有能否分解淀粉。α-淀粉酶該酶可以把淀粉分解,因淀粉遇碘變藍(lán)色,如菌落周圍有無色圈,說明該菌能分解淀粉

  2)步驟:

  將培養(yǎng)的的各種待測菌種接種在含有2%淀粉液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基的配制—稱取蛋白胨1.0g;NaCl0.5g;牛肉膏0.3g;可溶性淀粉0.2g;瓊脂1.5g;pH6.4左右;100ml水定容(注:先將可溶性淀粉加少量蒸餾水調(diào)成糊狀,再加到溶化好的培養(yǎng)基中,調(diào)勻),倒置于37℃溫箱中培養(yǎng)18-24小時后,取出平板,向皿中注入l滴Lugol氏碘液,因淀粉遇碘變藍(lán)色,如菌落周圍有無色圈,說明該菌能分解淀粉。

  6、純化從平板上選取淀粉水解圈直徑與菌落直徑之比較大的菌落,用接種環(huán)沾取少量培養(yǎng)物至斜面上,并進(jìn)行2-3次劃線分離,挑取單菌落至斜面上,培養(yǎng)后觀察菌苔生長情況并鏡檢驗證為純培養(yǎng)。

實驗設(shè)計方案 篇3

  一、研究問題:

  任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法在中學(xué)信息技術(shù)課程教學(xué)中的應(yīng)用對學(xué)生綜合能力提高的作用

  二、實驗處理:

  對比性實驗:普通班與實驗班的對比

  等組實驗:普通班與實驗班的對比

  三、實驗變量

  1、實驗自變量

  X=中學(xué)信息技術(shù)課程中任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法的使用

  2、實驗因變量

  Y1=獲取信息的能力

  Y2=合作學(xué)習(xí)的能力

  Y3=對信息評價的能力

  Y4=反省認(rèn)知的能力

  Y5=自我評價的能力

  3、干擾變量及其控制

  干擾變量:(1)學(xué)生信息技術(shù)素養(yǎng)和技術(shù)水平的不同

  (2)任務(wù)驅(qū)動教學(xué)過程中任務(wù)的設(shè)計、使用的合理性與正確性。

  (3)學(xué)生與他能力的變化發(fā)展對這五種能力的影響。

  干擾變量的控制:

  (1)為了確保信息技術(shù)課程教學(xué)效果的提高是由于任務(wù)驅(qū)動教學(xué)方法的使用的作用而不是其它因素的作用,本實驗研究過程中采用等組對比實驗。

  (2)為避免由于任務(wù)驅(qū)動教學(xué)中任務(wù)的'設(shè)計不合理而對實驗效果產(chǎn)生影響,在進(jìn)行實驗前應(yīng)由教學(xué)設(shè)計專家、學(xué)科帶頭教師和學(xué)生對設(shè)計的任務(wù)的合理性進(jìn)行論證,布爾什確保任務(wù)的合理性。

  (3)為降低其它因素對教學(xué)效果的影響,先對學(xué)生的確基本學(xué)習(xí)能力、信息素養(yǎng)和計算機(jī)技術(shù)水平等因素進(jìn)行調(diào)查分析,并對其它教學(xué)方法在教學(xué)中的應(yīng)用所產(chǎn)生的效果作預(yù)測分析,最終對教學(xué)效果進(jìn)行分析時加以考慮并予以排除。

  四、試驗程序設(shè)計

  1、實驗假設(shè)

  (1)任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法對學(xué)生獲取信息的能力的提高有顯著的作用

  (2)任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法對學(xué)生合作學(xué)習(xí)的能力的提高有顯著的作用

  (3)任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法對對信息評價的能力的提高有顯著的作用

  (4)任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法對反省認(rèn)知的能力的提高有顯著的作用

  (5)任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法對自我評價的能力的提高有顯著的作用

  2、實驗對象

  在附中信息技術(shù)教學(xué)中選取高二(3)、(4)班和第二中學(xué)信息技術(shù)教學(xué)中選取高二(2)、(5)班為實驗對象;附中高二(3)班和第二中學(xué)高二(2)為實驗組,教學(xué)中采用任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法;附中高二(4)班和第二中學(xué)高二(5)班為控制班,教學(xué)中不采用任務(wù)驅(qū)動教學(xué)法;實驗實施前對學(xué)生能力進(jìn)行前測,確認(rèn)兩班同學(xué)在這三個方面的能力相當(dāng),視為等組。

  ●控制1=附中高二(4)班部分學(xué)生和二中高二(5)班

  ●實驗1=附中高二(3)班部分學(xué)生和二中高二(2)班

  (注:考慮到前測時可能兩個學(xué)校的兩個班不一定全部可以分為兩個等組,故從兩學(xué)校的兩班中分別選取部分同學(xué)形成兩個等組。為不影響實驗的正常、順利進(jìn)行,對不納入實驗的同學(xué)也實施同樣的實驗手段,但不納入數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析中)

  3、實驗過程

  本實驗研究采用等組對比前測后測實驗研究。

  (1)利用里克特量表對預(yù)期的實驗對象進(jìn)行前測,并分別從兩個自然班中選取部分學(xué)生組成實驗組和控制組:實驗組和控制組。

  (2)利用調(diào)查問卷對實驗對象進(jìn)行學(xué)習(xí)風(fēng)格、能力結(jié)構(gòu)等因素進(jìn)行調(diào)查研究,了解學(xué)生的特點和已具備的能力狀況,為以后的效果分析掃清障礙。

  (3)在兩個學(xué)校的兩個實驗班的教學(xué)中任務(wù)驅(qū)動教學(xué)方法(教學(xué)內(nèi)容和任務(wù)驅(qū)動基本架構(gòu)是由研究者和學(xué)科教師根據(jù)研究和教學(xué)的需要共同確定的)。在教學(xué)的過程中利用行為觀察記錄表、反思日志表、調(diào)查問卷、里克特量表等工具對學(xué)生的行為進(jìn)行觀察和記錄。

  (4)在研究進(jìn)行兩個月左右時對學(xué)生這三種能力的發(fā)展進(jìn)行形成性檢驗,發(fā)現(xiàn)存在的問題,并針對問題提出解決措施,進(jìn)行補(bǔ)救。

  (5)學(xué)期結(jié)束時,對學(xué)生這三種能力的發(fā)展進(jìn)行終結(jié)性檢驗,驗證實驗假設(shè)是否成立,如成立,用實驗數(shù)據(jù)證明,如不成立,說明原因。

實驗設(shè)計方案 篇4

  1實驗器材

  低頻信號發(fā)生器(EE1641C型),便攜式電腦小音箱,仿真蝴蝶(冰箱貼),BNC轉(zhuǎn)雙鱷魚夾線。

  2演示方法

  2.1演示聲音具有“音調(diào)”這一特性

  將仿真蝴蝶用膠水粘在音箱的紙盆上,用BNC轉(zhuǎn)雙鱷魚夾線將低頻信號發(fā)生器與音箱相連。通過低頻信號發(fā)生器的“頻率選擇”按鈕,使信號源的頻率在“10”、“100”、“1K”三個檔位之間進(jìn)行切換。這時,音箱既可以發(fā)出低沉的聲音也可以發(fā)出尖銳的甚至是刺耳的聲音,音調(diào)變化十分顯著。由此,學(xué)生可以深刻地感受到聲音可高可低,具有“音調(diào)”這樣的特性。注意事項:實際上,在調(diào)節(jié)信號源頻率時,聲音的響度也會發(fā)生變化。為了將學(xué)生的注意力集中在音調(diào)的變化上,可以適當(dāng)?shù)靥岣咭粝涞囊袅浚驗楫?dāng)聲強(qiáng)大于85dB時,耳朵對各個頻率聲音的靈敏度基本上相等。

  2.2演示“音調(diào)與頻率的關(guān)系”

  將低頻信號發(fā)生器的頻率檔位選擇在“10”,轉(zhuǎn)動“頻率微調(diào)”旋鈕,對信號源頻率進(jìn)行連續(xù)調(diào)節(jié),可以觀察到:蝴蝶振動速度發(fā)生變化的同時,聲音的音調(diào)也發(fā)生了變化。蝴蝶振動加快,音調(diào)變高;振動變慢,音調(diào)變低。這樣的實驗現(xiàn)象強(qiáng)化了學(xué)生的直觀感受,為學(xué)生作出合理猜想和進(jìn)一步的實驗檢驗奠定了基礎(chǔ),也有利于學(xué)生“頻率”概念的建立。注意事項:一定要在“低頻”檔對信號進(jìn)行“連續(xù)”調(diào)節(jié)。聲音控制在低頻是為了人眼能夠觀察到振動,對信號頻率進(jìn)行連續(xù)調(diào)節(jié)可以使音調(diào)以及振動速度的變化更易察覺。

  3演示用途拓展

  此套裝置除了可以很好地演示“音調(diào)與頻率的關(guān)系”外,還可以演示其他一些聲現(xiàn)象,而且效果也相當(dāng)不錯。

  3.1演示“聲音是由于物體的振動產(chǎn)生的”

  音箱發(fā)出聲音的同時,蝴蝶也在振動,音箱不發(fā)聲,蝴蝶振動停止。借助于這一現(xiàn)象,學(xué)生可以猜想到:聲音可能是由于物體的振動產(chǎn)生的。

  3.2演示“聲音是一種波”

  將點燃的蠟燭放在音箱前,在頻率較低的情況下,可以清楚地看到燭焰周期性的來回晃動,借助于此實驗現(xiàn)象,教師可以引出“聲波”的概念。

  3.3演示“響度與振幅的關(guān)系”

  在小音箱的喇叭口置一透明容器,將橡皮泥捏成的小球放在音箱的紙盆上,調(diào)節(jié)音箱的音量,可以控制小球的彈跳高度。小球的重量較輕,在不同響度的聲音下,小球振動幅度的變化較為明顯,這一現(xiàn)象可以演示響度與聲源的振動幅度的關(guān)系。

  3.4演示“次聲波”和“超聲波”

  從“0”到“10M”順次切換低頻信號發(fā)生器的頻率檔位,可以發(fā)現(xiàn)人耳并不是所有頻率的聲音都能聽到。借助這一現(xiàn)象,教師可以引出“超聲波”和“次聲波”的概念。以上介紹的演示實驗,現(xiàn)象新奇、直觀,在激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣的同時能幫助學(xué)生理解所學(xué)的概念,希望能為教師們的實際教學(xué)提供些許參考。

實驗設(shè)計方案 篇5

  一.實驗?zāi)康?/p>

  1、學(xué)習(xí)從土壤中分離、純化微生物的原理與方法。

  2、學(xué)習(xí)、掌握微生物的鑒定方法。

  3、對提取的土樣進(jìn)行微生物的分離、純化培養(yǎng),并進(jìn)行簡單的形態(tài)鑒定

  4、對簡單鑒定后的微生物進(jìn)行生理生化鑒定并由鑒定結(jié)果查伯杰氏手冊以確定分離出微生物的品種。

  二.實驗原理

  α-淀粉酶是一種液化型淀粉酶,它的產(chǎn)生菌芽孢桿菌,廣泛分布于自然界,尤其是在含有淀粉類物質(zhì)的土壤等樣品中。

  從自然界篩選菌種的具體做法,大致可以分成以下四個步驟:采樣、增殖培養(yǎng)、純種分離和性能測定。

  1、采樣:即采集含菌的樣品

  采集含菌樣品前應(yīng)調(diào)查研究一下自己打算篩選的微生物在哪些地方分布最多,然后才可著手做各項具體工作。在土壤中幾乎各種微生物都可以找到,因而土壤可說是微生物的大本營。在土壤中,數(shù)量最多的當(dāng)推細(xì)菌,其次是放線菌,第三霉菌,酵母菌最少。除土壤以外,其他各類物體上都有相應(yīng)的占優(yōu)勢生長的微生物。例如枯枝、爛葉、腐土和朽木中纖維素分解菌較多,廚房土壤、面粉加工廠和菜園土壤中淀粉的分解菌較多,果實、蜜餞表面酵母菌較多;蔬菜牛奶中乳酸菌較多,油田、煉油廠附近的土壤中石油分解菌較多等。

  2、增殖培養(yǎng)(又稱豐富培養(yǎng))

  增殖培養(yǎng)就是在所采集的土壤等含菌樣品中加入某些物質(zhì),并創(chuàng)造一些有利于待分離微生物生長的其他條件,使能分解利用這類物質(zhì)的微生物大量繁殖,從而便于我們從其中分離到這類微生物。因此,增殖培養(yǎng)事實上是選擇性培養(yǎng)基的一種實際應(yīng)用。

  3、純種分離

  在生產(chǎn)實踐中,一般都應(yīng)用純種微生物進(jìn)行生產(chǎn)。通過上述的增殖培養(yǎng)只能說我們要分離的微生物從數(shù)量上的劣勢轉(zhuǎn)變?yōu)閮?yōu)勢,從而提高了篩選的效率,但是要得到純種微生物就必須進(jìn)行純種分離。

  純種分離的方法很多,主要有:平板劃線分離法、稀釋分離法、單孢子或單細(xì)胞分離法、菌絲尖端切割法等。

  三.實驗材料

  1、器材:

  小鐵鏟和無菌紙或袋、培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、無菌水試管(每支4.5mL水)、燒杯、三角瓶、電爐、玻璃棒、接種環(huán)、鑷子、搪瓷杯、恒溫培養(yǎng)箱、高溫滅菌鍋、移液槍(槍頭)、天平、濾紙、pH試紙等。2、試劑:

  配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的原料(牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白胨)、Lugol氏碘液、0.2%可溶性淀粉液、結(jié)晶紫染液、番紅染液、碘液、95%乙醇、0.5%番紅水染液、無菌水等。3、土樣:取自桂林師專1棟宿舍樓后面土壤,地下10cm左右。

  四.實驗方法步驟

  1、采集土樣帶上小鐵鏟和無菌袋到土豆地采集較細(xì)碎土壤

  2、樣品稀釋在無菌紙上稱取樣品1g,放入100mL無菌水的三角瓶中,手搖10分鐘使土和水充分混合。用1mL無菌吸管吸取0.5mL注入4.5mL無菌水試管中,梯度稀釋至10。

  3、分離用稀釋樣品的同支吸管分別依次從10、10、10樣品稀釋液中,吸取lmL,注入無菌培養(yǎng)皿中,然后倒入滅菌并融化冷至50℃左右的固體培養(yǎng)基,小心搖動冷凝后,倒置于37℃溫箱中培養(yǎng)48小時。培養(yǎng)基的配制—稱取蛋白胨1.0g;NaCl0.5g;牛肉膏0.3g;瓊脂1.5g;pH6.4左右;100ml水定容。

  4、初步鑒定對多種菌進(jìn)行形態(tài)特征的觀察、簡單染色、革蘭氏染色以及芽孢染色觀察,記錄結(jié)果。

  5、α-淀粉酶鑒定

  6、1)實驗原理:

  細(xì)菌能否產(chǎn)生α-淀粉酶主要依據(jù)是鑒定有能否分解淀粉。α-淀粉酶該酶可以把淀粉分解,因淀粉遇碘變藍(lán)色,如菌落周圍有無色圈,說明該菌能分解淀粉

  2)步驟:

  將培養(yǎng)的的各種待測菌種接種在含有0.2%淀粉液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基的配制—稱取蛋白胨1.0g;NaCl0.5g;牛肉膏0.3g;可溶性淀粉0.2g;瓊脂1.5g;pH6.4左右;100ml水定容(注:先將可溶性淀粉加少量蒸餾水調(diào)成糊狀,再加到溶化好的培養(yǎng)基中,調(diào)勻),倒置于37℃溫箱中培養(yǎng)18-24小時后,取出平板,向皿中注入l滴Lugol氏碘液,因淀粉遇碘變藍(lán)色,如菌落周圍有無色圈,說明該菌能分解淀粉。

  8、純化從平板上選取淀粉水解圈直徑與菌落直徑之比較大的菌落,用接種環(huán)沾取少量培養(yǎng)物至斜

  面上,并進(jìn)行2-3次劃線分離,挑取單菌落至斜面上,培養(yǎng)后觀察菌苔生長情況并鏡檢驗證為純培養(yǎng)。

  四.實驗結(jié)果

  五.個人總結(jié)

  1、在分離實驗中,原土樣的10-3g/mL濃度中得到5種不同的能夠分解淀粉的菌落,經(jīng)初步淀粉酶實驗,1號菌的淀粉分解圈大,2號、3號、4號次之,5號最小。

  2、在淀粉酶試驗中,3號培養(yǎng)基感染雜菌,出現(xiàn)不同菌落,故后面不再對其處理;其它菌種均得到較純的單菌落,淀粉酶實驗結(jié)果不變,與上面相同。

  3、各種菌落的革蘭氏染色中大部分為陽性,菌體形態(tài)多為橢圓形趨于桿狀,只有4號菌為陰性;5號菌菌落難以挑故過沒能進(jìn)行染色。

  4、1號、2號、4號經(jīng)劃線純化均得到單菌落,5號菌沒能劃出單菌落;綜合分析可以判定,1號菌即為優(yōu)良的淀粉酶產(chǎn)生菌,即為枯草芽孢桿菌。

  5、本次實驗遇到一件讓人頗為尷尬的事情,那就是實驗所用酒精燈的酒精被煤油替換,連消毒棉也是煤油的,因為使用煤油產(chǎn)生大量的黑煙,導(dǎo)致大量顆粒吸附在實驗器具上,其氣味也難以忍受,故在實際操作中減少了使用,引起帶來的影響尚不明確。

實驗設(shè)計方案 篇6

  一、實驗名稱:臨時裝片、切片、涂片的制作、觀察和指導(dǎo)

  二、實驗?zāi)繕?biāo):讓學(xué)生通過獨立自主的制作臨時裝片、切片、涂片的方法來感知細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu),從而使學(xué)生對細(xì)胞達(dá)到一定的認(rèn)識,為以后的教學(xué)作下鋪墊。制作臨時裝片的成功,對提高學(xué)生的生物學(xué)興趣和生物科學(xué)素養(yǎng)都起著重要的作用。同時,這樣鍛煉了學(xué)生的動手能力,也培養(yǎng)了學(xué)生的自己動腦思考的能力。

  三、實驗方法及步驟:

  (一)實驗材料:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、刀片、吸水紙、解剖針、毛筆、滴管、擦鏡紙;清水、碘酒溶液;西紅柿、空心蓮子草、洋蔥;創(chuàng)可貼(切片時可能會有人受傷)

  (二)實驗步驟:

  1、臨時裝片的制作

  ⑴準(zhǔn)備

  擦用擦鏡紙把載玻片和蓋玻片擦拭干凈

  改進(jìn):將潔凈的紗布改為擦鏡紙,擦拭玻片時要注意用左手的拇指和食指夾住玻片的兩端,右手的拇指和食指襯墊上潔凈的紗布后,夾在玻片兩面,同時擦拭,以防將玻片損壞,滴用滴管在載玻片中央滴1-2滴清水

  改進(jìn):在制片時至少滴2滴清水,這樣加蓋玻片時,蓋玻片下的空間中水較充盈,氣泡就少,細(xì)胞的活性也較好取用刀片在洋蔥表面上劃“井”字(大約0.5cm2),用鑷子撕取外表皮

  問題:由于葉表皮皺縮、學(xué)生不熟練等,導(dǎo)致撕下的表皮薄膜過厚,在顯微鏡視野中難以找到理想的觀察對象,致使實驗效果較差。

  改進(jìn):首先將洋蔥鱗片葉切成寬1.0-1.5cm的縱向窄條,再用刀片將洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)表皮劃成小塊(切忌劃透),然后用鑷子夾住所劃表皮的邊緣,將其輕輕取下(洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)表皮易與葉肉分離,操作簡便)即可。這一改進(jìn)降低了實驗操作難度,提高了制片質(zhì)量。放把撕取的表皮浸入載玻片上的水滴中,并展平

  ⑵蓋蓋玻片

  蓋用鑷子夾起蓋玻片,使它的一邊先接觸載玻片上的水滴,然后緩緩地放下,蓋在要觀察的材料上

  ⑶染色

  染:將玻片傾斜10度左右,從高的一側(cè)滴入碘液,讓其自己流入玻片。問題:染色時書中要求是把1-2滴碘液滴在蓋玻片的一側(cè),然后用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引,使染液浸潤標(biāo)本的全部。然而,部分同學(xué)可能將蓋玻片下所有水全部吸干,做出的裝片會有很多的大氣泡,且氣泡將細(xì)胞掩蓋了,或者有人將氣泡誤認(rèn)為細(xì)胞。

  改進(jìn):染色時不用吸水紙吸水,而是將玻片傾斜10度左右,這個角度一定不能太大,太大水就會流出蓋玻片下的小空間,然后從較高一側(cè)的蓋玻片與載玻片的縫隙往里滴碘液,讓碘液自己流進(jìn)蓋玻片下,如果有液體流到蓋玻片外,用吸水紙擦拭,但一定要強(qiáng)調(diào)不能從蓋玻片邊緣吸水,蓋玻片周圍一定要有充盈的液體,這樣才不會出現(xiàn)大氣泡。

  ⑷鏡檢

  用顯微鏡觀察

  2、臨時切片的制作

  ⑴選材

  選擇軟硬適度的材料,先截成適當(dāng)長度,一般以20-30mm為宜(便于手持即可),材料太軟,可用馬鈴薯塊莖、胡蘿卜根或肥皂將欲切取的材料夾住一起進(jìn)行切片,本實驗用空心蓮子草,可直接用于切片。

  ⑵切片

  用三只手指夾住空心蓮子草,(使其高于手指,右手持刀片(刀片用水潤濕),將空心蓮子草削去一層,形成平面,刀口向內(nèi),與斷面平行,以均勻的動作,自左前方向右后方快速拉刀,滑行切片(注意要整個臂部用力,而不要腕部用力)。

  ⑶鏡檢

  如此連續(xù)動作,切下一些薄片,然后用毛筆將最薄的幾片材料移至滴有一滴清水的潔凈的載玻片中央,蓋上蓋玻片,用顯微鏡觀察。

  3、臨時涂片的制作

  ⑴把成熟的番茄果肉放在培養(yǎng)皿內(nèi),讓汁液流出(汁液中有均勻的離散細(xì)胞)。⑵吸取汁液,滴在潔凈的載玻片上,將涂抹的液滴滴于載玻片的中央或偏右約1/4處,左手持載玻片或放在平臺上,右手持另一載玻片作推片。先慢慢向右移動,讓短邊接觸溶液,兩載玻片的夾角約為30-45度,再向左迅速推載玻片,即可涂成一均勻的薄片。(也可用解剖針、牙簽、火柴桿等涂成薄片,蓋上蓋玻片即可。)

  四、預(yù)期結(jié)果:

  1、成功觀察到了洋蔥表皮細(xì)胞、西紅柿果肉細(xì)胞及空心蓮子草莖的結(jié)構(gòu)。

  2、通過使用顯微鏡對細(xì)胞的觀察,同學(xué)們對顯微鏡的使用有進(jìn)一步的了解和認(rèn)識

  3、通過學(xué)生們對臨時裝片、切片、涂片獨立自主的制作,使得大家基本掌握制作臨時裝片、切片、涂片的方法

  4、通過對細(xì)胞結(jié)構(gòu)的觀察,使同學(xué)們對于細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)有更進(jìn)一步的了解。

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